Anticuerpo policlonal de conejo anti-HBGP1 para WB, ELISA - P69891

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la subunidad gamma-1 de la hemoglobina

• La subunidad gamma-1 de la hemoglobina (HBG1) es un componente de la hemoglobina fetal (HbF), que es un tetrámero compuesto por dos cadenas alfa y dos cadenas gamma.
• La HbF es la hemoglobina predominante durante el desarrollo fetal y es reemplazada gradualmente por la hemoglobina adulta (HbA) después del nacimiento. Tiene una mayor afinidad por el oxígeno en comparación con la hemoglobina adulta, lo que facilita la transferencia de oxígeno de la madre al feto.
• El gen HBG1 pertenece al grupo de genes de la beta-globina en el cromosoma 11. Existe un gen gamma-2 estrechamente relacionado (HBG2) que difiere en un solo aminoácido; la cadena gamma-1 también se conoce como cadena A-gamma, mientras que la gamma-2 es la cadena G-gamma.
• HBG1 se expresa específicamente en los glóbulos rojos y su expresión está regulada durante el desarrollo, permaneciendo silenciada en las células eritroides adultas, excepto en ciertas condiciones patológicas o en la persistencia hereditaria de la hemoglobina fetal (HPFH).
• La proteína es una proteína de unión al grupo hemo, esencial para el transporte de oxígeno. Contiene hierro y está sujeta a modificaciones postraduccionales, incluidas la acetilación, la fosforilación y la S-nitrosilación, según indican los estudios proteómicos.
• Los estudios estructurales (palabra clave de estructura 3D) han elucidado la conformación de la hemoglobina fetal. La secuenciación directa de proteínas ha confirmado la estructura primaria.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a la región N-terminal (aa 1-100) de HBG1 humano. Debido a la elevada similitud de secuencia con HBG2, que difiere en un solo aminoácido en esta región, el anticuerpo puede presentar reactividad cruzada con HBG2. Valide la especificidad en sistemas de muestra relevantes.
• En el Western blot, se espera una banda de aproximadamente 16 kDa. Utilice controles positivos, como lisado de hígado fetal o lisado de sangre de cordón umbilical, que expresan niveles elevados de HBG1. Asegúrese de realizar una carga y transferencia adecuadas de las proteínas.
• Para ELISA, considere utilizar proteína HBG1 recombinante o HbF purificada como antígeno de recubrimiento. La reactividad cruzada notificada con ratón y rata sugiere la presencia de epítopos conservados, pero confirme la reactividad en estas especies mediante alineación de secuencias y experimentos piloto.
• Incluya siempre controles positivos y negativos adecuados para interpretar los resultados con precisión. Titule el anticuerpo para obtener una relación señal-ruido óptima en su configuración experimental específica.

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