Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-HDAC3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O15379

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de HDAC3

• HDAC3 es una histona deacetilasa de clase I que cataliza la desacetilación de residuos de lisina en las colas N-terminales de las histonas centrales (H2A, H2B, H3, H4), lo que conduce a una estructura de cromatina condensada y represión transcripcional epigenética.
  Referencias relacionadas: PMID:21030595, PMID:23911289
• Funciona como parte de complejos represores multiproteicos como N-Cor, y es reclutado por factores de transcripción como BCL6 para desacetilar H3K27 en elementos potenciadores, antagonizando la actividad de EP300.
  Referencias relacionadas: PMID:23911289, PMID:22230954
• Más allá de las histonas, HDAC3 desacetila una variedad de sustratos no histónicos que incluyen RARA, STAT3, MAPK14 y MEF2D, afectando vías desde la inflamación hasta la supervivencia celular.
  Referencias relacionadas: PMID:15653507, PMID:21030595, PMID:21444723, PMID:28167758
• HDAC3 también actúa como una proteína-lisina deacilasa, eliminando modificaciones de acilo no acetilo como grupos crotonilo (descrotonilación), lactilo (delactilación) e 2-hidroxiisobutirilo, con sustratos como MAPRE1/EB1 y NBN/NBS1.
  Referencias relacionadas: PMID:28497810, PMID:29192674, PMID:34608293, PMID:38961290
• En el reloj circadiano, HDAC3 tiene funciones independientes de su actividad deacetilasa: promueve la ubiquitinación de BMAL1 y estabiliza las proteínas CRY, regulando así la expresión génica circadiana y el metabolismo lipídico hepático.
• Subcelularmente, HDAC3 es predominantemente nuclear y asociada a cromosomas, pero también se detecta en el citoplasma, consistente con sus funciones de traslado.
• Ampliamente expresado en diversos tejidos, HDAC3 es una fosfoproteína con empalme alternativo y múltiples socios de interacción, lo que subyace a su participación en diversos procesos biológicos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (aa 299–428) se dirige a la región C-terminal de HDAC3 humano, que está conservada en ratón y rata (como indican los datos de reactividad cruzada); verifique la reactividad cruzada en su sistema modelo específico.
• En Western blot, HDAC3 tiene un peso molecular predicho de ~49 kDa; utilice estándares de proteína apropiados y confirme la especificidad de la banda con lisados celulares de knockdown por siRNA o KO si están disponibles.
• Para IHC-P, pueden ser necesarios métodos de recuperación de antígeno (por ejemplo, tampón citrato pH 6.0, inducido por calor); pruebe un rango de diluciones de anticuerpo (por ejemplo, 1:50–1:200) en tejidos control.
• Para IF/ICC, fije las células con PFA al 4% y permeabilice con Tritón X-100 al 0.1%; debe observarse localización nuclear; incluya controles solo con anticuerpo secundario.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar en formatos directos o indirectos; realice una titulación contra proteína HDAC3 recombinante para determinar las concentraciones óptimas de recubrimiento y detección.
• Almacene el anticuerpo a -20°C en alícuotas; evite ciclos repetidos de congelación-descongelación para mantener el rendimiento.

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