Anticuerpo policlonal de conejo anti-heparanasa 1 para WB, IHC-P, IF/ICC y ELISA - Q9Y251

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la heparanasa

• La heparanasa (HPSE, también conocida como HPA1, HPR1, HSE1, HPSE1) es una endo-β-glucuronidasa que escinde específicamente los proteoglucanos de sulfato de heparano (HSPG) en fragmentos más pequeños, desempeñando un papel clave en la degradación y remodelación de la matriz extracelular (MEC).
• La enzima presenta una actividad dependiente del pH: es esencialmente inactiva a pH neutro, pero altamente activa en condiciones ácidas, como las que se encuentran durante la invasión tumoral, la inflamación y la cicatrización de heridas.
• La heparanasa se sintetiza inicialmente como un precursor de 65 kDa que experimenta un procesamiento proteolítico para generar un heterodímero maduro y activo compuesto por subunidades de 8 kDa y 50 kDa; la enzima madura se localiza principalmente en los lisosomas y puede secretarse.
• Los estudios de fraccionamiento subcelular e inmunohistoquímica muestran la presencia de heparanasa en la membrana lisosomal, en el núcleo y como proteína secretada, lo que sugiere funciones versátiles tanto en los microambientes intracelulares como extracelulares.
• La expresión tisular es notable en la placenta y el bazo, con niveles más bajos en los ganglios linfáticos, el timo, los leucocitos de sangre periférica, la médula ósea, las células endoteliales, el hígado fetal y diversos tejidos tumorales; dentro de los folículos pilosos, se detecta específicamente en las capas de la vaina radicular interna.
• Además de su función enzimática, la heparanasa modula la adhesión celular, promueve la fosforilación de AKT1/PKB mediante balsas lipídicas, aumenta la angiogénesis mediada por VEGF a través de la activación de SRC y actúa como procoagulante al potenciar la activación del factor X.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 36–275) corresponde a una región que probablemente excluye el péptido señal N-terminal, lo que podría permitir la detección de la forma madura de la heparanasa; considere verificar la reactividad tanto con la proforma (~65 kDa) como con las subunidades procesadas (50 kDa y 8 kDa) en las condiciones de su ensayo.
• Para la transferencia Western, prepare los lisados a pH neutro y considere utilizar un control positivo de tejido de placenta o bazo, donde la expresión de HPSE es elevada; se espera una banda cercana a 61–65 kDa.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), pruebe el anticuerpo en cortes incluidos en parafina o congelados de placenta, bazo o xenoinjertos tumorales, que expresan intensamente heparanasa, e incluya un control de isotipo.
• Para aplicaciones de ELISA, utilícelo como anticuerpo de captura o de detección después de confirmar la compatibilidad del par; la proteína recombinante de heparanasa (por ejemplo, el inmunógeno) puede servir como estándar.

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