Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-HER2/ErbB2 para WB, IHC, IF - P04626

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de HER2/ErbB2

• El receptor tirosina quinasa erbB-2 (también conocido como HER2, Neu, CD340) es un miembro de la familia del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) y funciona como oncogén en varios tipos de cáncer. Carece de un ligando directo conocido, pero actúa como correceptor para formar complejos de señalización activos con otros miembros de la familia EGFR después de la unión de la neuregulina.
• HER2/ErbB2 desempeña un papel fundamental en la regulación del crecimiento celular, la diferenciación y la supervivencia a través de vías de señalización posteriores, incluidas las cascadas PI3K/AKT y RAS/RAF/MEK/ERK. También media la estabilización de los microtúbulos a través de la vía MEMO1-RHOA-DIAPH1, lo que influye en la polaridad y la migración celular.
• La proteína se localiza predominantemente en la membrana celular, pero después de la activación puede translocarse al núcleo, donde funciona como factor de transcripción. Se une a secuencias promotoras específicas (por ejemplo, TCAAATTC) y regula genes como PTGS2/COX-2 y CDKN1A, potenciando la síntesis de ARNr y el crecimiento celular.
• La distribución subcelular incluye membrana celular, membranas onduladas, endosomas tempranos, citoplasma, región perinuclear y núcleo, lo que refleja su tráfico dinámico y sus funciones multifuncionales.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, glicosilación y formación de enlaces disulfuro, que son esenciales para su estabilidad, dimerización y actividad quinasa.
• Especificidad tisular: Se expresa altamente en una variedad de tejidos tumorales epiteliales, incluidos los tumores de mama primarios, así como tumores del intestino delgado, esófago, riñón y cavidad oral, lo que lo convierte en un biomarcador clave y un objetivo terapéutico.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno comprende el dominio extracelular (aa 23-652), lo que permite la detección de HER2/ErbB2 de longitud completa. Esta región es comúnmente objetivo en muchos anticuerpos diagnósticos y puede proporcionar una especificidad favorable.
• Para transferencia Western, la banda esperada es de aproximadamente 138 kDa. Utilice marcadores de peso molecular apropiados y valide con una línea celular de control positivo que se sabe que sobreexpresa HER2, como SK-BR-3 o BT-474.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF-P), pueden ser necesarios métodos de recuperación de antígenos (por ejemplo, tampón de citrato pH 6.0, inducido por calor). Titule el anticuerpo para optimizar la relación señal-ruido para su tejido y protocolo de fijación específicos.
• Para IHC múltiple (mIHC), verifique la compatibilidad con otros anticuerpos primarios y sistemas de detección. Debido a su expresión robusta en ciertos tumores, considere usar una serie de diluciones para evitar la interacción entre canales.
• La reactividad de este anticuerpo ha sido validada para muestras humanas; la reactividad cruzada con otras especies no ha sido determinada y debe verificarse experimentalmente si es necesario.

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