Anticuerpo Monoclonal Anti-HFE para WB, ELISA - Q30201

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de HFE

• HFE (Proteína de la Hemocromatosis Hereditaria), también denominada HLA-H, es una proteína de membrana que se une al receptor de transferrina (TFR) y reduce su afinidad por la transferrina cargada de hierro, regulando así la captación de hierro.
• El gen que codifica HFE pertenece a la familia del MHC de clase I; las mutaciones en HFE están asociadas con la hemocromatosis hereditaria, un trastorno de sobrecarga de hierro, lo que es consistente con su clasificación como una variante de proteína de enfermedad.
• Según UniProt, HFE se expresa en todos los tejidos analizados excepto en el cerebro, lo que indica una distribución amplia pero no ubicua.
• A nivel subcelular, HFE se localiza en la membrana celular, donde interactúa con TFR y otras proteínas relacionadas con el hierro para controlar la homeostasis sistémica del hierro.
• El splicing alternativo de HFE produce múltiples isoformas, que pueden tener distribuciones tisulares y roles funcionales distintos; la forma de longitud completa unida a la membrana es la especie principal.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glicosilación y la formación de enlaces disulfuro, las cuales son críticas para un plegamiento correcto y la expresión en la superficie celular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido sintético que abarca los aminoácidos 249–348 de la HFE humana, una región que incluye parte del dominio extracelular, la hélice transmembrana y la cola citoplasmática. Este diseño puede permitir la detección de formas de longitud completa y ciertas formas truncadas en Western blot desnaturalizante.
• Para Western blot, considere usar lisados de proteínas totales de tejidos que expresan HFE, como el hígado o la placenta (excluyendo el cerebro, donde HFE está ausente). Optimice las condiciones de bloqueo y dilución del anticuerpo para su tipo de muestra específico.
• Para aplicaciones de ELISA, el rendimiento del anticuerpo puede depender del formato del ensayo (directo, indirecto o sándwich). Valide el clon en su matriz de muestra objetivo y considere emparejarlo con un anticuerpo de captura que reconozca un epítopo distinto.
• Dado que HFE es una proteína de membrana, asegure una solubilización y desnaturalización adecuadas durante la preparación de la muestra para exponer el epítopo, particularmente si el inmunógeno es parcialmente intracelular.
• Se informa reactividad cruzada para la HFE humana; para su uso con otras especies, debe verificarse la homología de secuencia.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

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