Anticuerpo policlonal anti-HFE para WB, ELISA - Q30201

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de HFE

• HFE es una proteína de la membrana celular implicada principalmente en la regulación del transporte del hierro.
• Se une al receptor de transferrina (TFR) y modula la captación celular de hierro al reducir la afinidad del TFR por la transferrina unida al hierro.
• La proteína se expresa ampliamente en los tejidos humanos, con la notable excepción del cerebro.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glucosilación y la formación de enlaces disulfuro, importantes para su estructura y función.
• Las mutaciones en HFE están relacionadas con la hemocromatosis hereditaria, una enfermedad por sobrecarga de hierro.
• El gen experimenta corte y empalme alternativo, lo que da lugar a múltiples variantes de transcritos.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno comprende los aminoácidos 80-306, correspondientes a una parte considerable del dominio extracelular. Esta región presenta homología con HFE de ratón, lo que respalda la reactividad cruzada; sin embargo, la especificidad debe validarse en el sistema de muestras de destino.
• Para Western blot, se espera una banda cercana a 40 kDa en condiciones reductoras. La glucosilación puede provocar un peso molecular aparente ligeramente superior; considere utilizar enzimas de desglicosilación si se requiere una determinación precisa del tamaño.
• Para ELISA, este anticuerpo policlonal puede utilizarse como reactivo de captura o de detección. Las concentraciones óptimas de recubrimiento y las condiciones de emparejamiento deben determinarse empíricamente.
• Incluya controles positivos, como lisados celulares con sobreexpresión de HFE, y controles negativos, como lisados de tejido cerebral o muestras knockout, para confirmar la especificidad.

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