Anticuerpo policlonal de conejo anti-HHLA2 para WB, IHC-P y ELISA - Q9UM44

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de HHLA2

• HHLA2 (también conocida como B7-H7, B7y, B7-H5) es un miembro de la familia B7 de ligandos reguladores inmunitarios, caracterizada por un dominio de inmunoglobulina, enlaces disulfuro y motivos de glicosilación.
• Funciona como una molécula coestimuladora en células presentadoras de antígeno, interactuando con TMIGD2 en células T para mejorar la activación mediada por TCR, la proliferación y la producción de citoquinas a través de una cascada de señalización dependiente de AKT.
• HHLA2 es una glicoproteína transmembrana de tipo I de paso único localizada en la superficie celular, con un péptido señal, dominios extracelulares tipo Ig, una hélice transmembrana y una cola citoplasmática.
• Se expresa en una variedad de tejidos, incluidos colon, riñón, testículo, pulmón y páncreas, y en niveles más bajos en intestino delgado, hígado y músculo esquelético. En células inmunitarias, se expresa altamente en células B, células dendríticas y macrófagos, pero no se detecta en células T.
• La proteína sufre un empalme alternativo, produciendo múltiples isoformas que pueden diferir en sus propiedades funcionales.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen la glicosilación N-ligada y la formación de enlaces disulfuro, que son críticas para su estabilidad estructural y las interacciones ligando-receptor.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno, correspondiente al dominio extracelular (aa 30-200), fue diseñado para generar anticuerpos que reconozcan la HHLA2 nativa, potencialmente adecuados para detectar la proteína expresada en superficie en IHC-P y la proteína total en WB.
• Para el western blot, considere usar condiciones reductoras para resolver estructuras con enlaces disulfuro; el peso molecular predicho es de ~47 kDa, que puede aparecer más alto debido a la glicosilación.
• Valide la especificidad del anticuerpo en líneas celulares o tejidos humanos relevantes conocidos por expresar HHLA2 (p. ej., colon, riñón), utilizando controles negativos (p. ej., células T) para confirmar la ausencia de reactividad cruzada.
• En ELISA, el anticuerpo se puede utilizar como reactivo de captura o detección; establezca experimentalmente las condiciones óptimas de recubrimiento y bloqueo.

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