Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-HIF1α para WB, IF/ICC, ELISA - Q16665

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de HIF1α

• HIF1α es un regulador transcripcional maestro de la respuesta adaptativa a la hipoxia, activando más de 40 genes involucrados en la entrega de oxígeno y la adaptación metabólica (eritropoyetina, VEGF, enzimas glucolíticas, etc.). Referencias relacionadas: PMID:11292861, PMID:11566883, PMID:15465032
• Forma un heterodímero con ARNT y se une a elementos de respuesta a la hipoxia (HREs) que contienen la secuencia central 5'-TACGTG-3' en los promotores de genes diana. La activación transcripcional requiere el reclutamiento de coactivadores como CREBBP y EP300, y se ve potenciada por NCOA1/NCOA2 y APEX1. Referencias relacionadas: PMID:16543236, PMID:9887100, PMID:10594042, PMID:10202154
• Además de sus funciones hipóxicas canónicas, HIF1α participa en la distribución axonal de mitocondrias en neuronas durante la hipoxia. Referencias relacionadas: PMID:19528298
• Tras la infección por SARS-CoV-2, HIF1α es necesario para la inducción de la glucólisis y el estado proinflamatorio en monocitos, potenciando la replicación viral y la expresión de citoquinas (IL1B, TNF, IL6, interferones). Referencias relacionadas: PMID:32697943
• HIF1α se expresa de forma ubicua con los niveles más altos en riñón y corazón; comúnmente se sobreexpresa en cánceres debido a hipoxia intratumoral o mutaciones oncogénicas, y muestra expresión elevada en tumores pituitarios en comparación con el tejido pituitario normal.
• La proteína se localiza en el citoplasma, núcleo y speckles nucleares, lo que refleja su transporte dinámico y actividad transcripcional.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen hidroxilación, acetilación, fosforilación, S-nitrosilación y ubiquitinación, que regulan la estabilidad de la proteína y la actividad transcripcional.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido sintético y se espera que reconozca la proteína HIF1α total en especies humanas y de ratón. Confirme la reactividad en su modelo experimental específico.
• Para Western blot, anticipe bandas de aproximadamente 83, 93 o 96 kDa dependiendo de la expresión de isoformas y modificaciones postraduccionales; utilice marcadores de peso molecular apropiados y controles positivos tratados con hipoxia para verificar la detección.
• En inmunofluorescencia/ICC, optimice la fijación y permeabilización para preservar tanto las señales de localización citoplasmática como nuclear; se recomienda la inducción de la estabilización de HIF1α mediante miméticos de hipoxia o incubación en bajo oxígeno antes de la tinción.
• Para aplicaciones de ELISA, valide el par de anticuerpos con HIF1α recombinante o lisados celulares tratados con hipoxia para garantizar un rango de detección lineal y sensibilidad.
• Dado que HIF1α se degrada rápidamente en condiciones de normoxia, pre-trate las células con inhibidores del proteasoma (por ejemplo, MG132) o expóngalas a hipoxia para acumular suficiente proteína diana para una detección robusta en todas las aplicaciones.

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