Anticuerpo policlonal de conejo anti-HIF1α para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16665

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de HIF1α

• HIF1α (factor 1-alfa inducible por hipoxia) es un regulador principal de la respuesta adaptativa celular y sistémica a la hipoxia, codificado por el gen HIF1A (también conocido como BHLHE78, MOP1, PASD8). Referencias relacionadas: PMID:11292861, PMID:11566883, PMID:15465032

• En condiciones de hipoxia, HIF1α se dimeriza con ARNT y se une a los elementos de respuesta a la hipoxia (HRE) para activar la transcripción de más de 40 genes diana implicados en el suministro de oxígeno, la angiogénesis y la reprogramación metabólica (p. ej., EPO, VEGF y enzimas glucolíticas). Referencias relacionadas: PMID:11292861, PMID:11566883, PMID:15465032

• El heterodímero HIF1α-ARNT recluta coactivadores transcripcionales como CREBBP y EP300 para iniciar la expresión de los genes diana. Referencias relacionadas: PMID:16543236, PMID:9887100

• Desempeña un papel fundamental en la vascularización embrionaria, la angiogénesis tumoral y la fisiopatología de la enfermedad isquémica. Referencias relacionadas: PMID:22009797

• La localización subcelular es principalmente citoplasmática en condiciones de normoxia; tras su estabilización por hipoxia, HIF1α se transloca al núcleo y a los cuerpos nucleares para ejercer sus funciones transcripcionales.

• HIF1α experimenta múltiples modificaciones postraduccionales, como hidroxilación, acetilación, fosforilación, S-nitrosilación y ubiquitinación, que regulan estrechamente su estabilidad y actividad transcripcional.

• Expresado en la mayoría de los tejidos humanos, con los niveles más altos en el riñón y el corazón, HIF1α se sobreexpresa con frecuencia en una amplia variedad de cánceres y sus metástasis debido a la hipoxia intratumoral y a mutaciones oncogénicas.

• Durante la infección por SARS-CoV-2, HIF1α es necesario para la inducción de la glucólisis en los monocitos, promoviendo un estado proinflamatorio y la replicación viral. Referencias relacionadas: PMID:32697943

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 400–500 de HIF1α humano (NP_001521.1), lo que puede contribuir a la reactividad cruzada del anticuerpo con los ortólogos de ratón y rata.
• En el Western blot (WB), HIF1α suele migrar a 93–96 kDa; pueden observarse bandas adicionales correspondientes a isoformas de corte y empalme o formas modificadas. Valide el resultado en el sistema de muestras pertinente, preferiblemente utilizando estímulos hipóxicos para aumentar la expresión de la diana.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), se recomienda optimizar la fijación, la recuperación antigénica y la amplificación de la señal. Considere incluir muestras de tejido hipóxico como controles positivos.
• Al igual que con todos los anticuerpos policlonales, debe verificarse la consistencia entre lotes y se recomienda realizar pruebas preliminares para confirmar la idoneidad para las condiciones específicas de su ensayo.

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