Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-HIF1AN/FIH-1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NWT6

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de HIF1AN (Factor inhibidor de HIF-1)

• HIF1AN (Factor inhibidor de HIF-1), también conocido como FIH-1 o asparagin hidroxilasa del factor inducible por hipoxia, es una dioxigenasa dependiente de oxígeno de 40,3 kDa codificada por el gen HIF1AN (GeneID 55662).
• Hidroxila principalmente la subunidad alfa de HIF-1 en el residuo Asn-803 del dominio de transactivación C-terminal (CAD) en condiciones normóxicas, impidiendo la interacción con coactivadores transcripcionales como CBP/p300, regulando así la respuesta hipóxica.
• Además de HIF-1α, FIH-1 hidroxila residuos específicos de asparagina, aspartato e histidina dentro de los dominios de repetición de anquirina (ARD) de diversas proteínas, entre ellas NFKB1, NFKBIA, NOTCH1, ASB4 y TNKS2.
• FIH-1 se localiza predominantemente en el núcleo y el citoplasma, con enriquecimiento en la región perinuclear, lo que coincide con su doble función en la regulación transcripcional y la señalización citoplasmática.
• Mediante la hidroxilación de NOTCH1, FIH-1 regula negativamente la actividad de NOTCH1, acelerando así la diferenciación miogénica; por el contrario, regula positivamente a ASB4 para promover la diferenciación vascular.
• La proteína contiene dominios catalíticos de unión a hierro y dioxigenasa, y su actividad está modulada por acetilación, lo que pone de relieve su papel como sensor clave que conecta la disponibilidad de oxígeno con los resultados transcripcionales.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 1–349, cubriendo la proteína FIH-1 de longitud completa; esto puede generar un reconocimiento de epitopos similar al de los policlonales, lo que favorece una detección robusta en múltiples aplicaciones. Para Western blot, se espera una banda de alrededor de 41 kDa en condiciones reductoras/desnaturalizantes; se recomienda incluir lisados celulares tanto normóxicos como hipóxicos para evaluar la expresión endógena.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), puede ser necesario optimizar los protocolos de recuperación de antígeno; los tejidos control con expresión elevada conocida de FIH-1 (por ejemplo, riñón e hígado) deben validarse junto con muestras tratadas con knockout o siARN.
• Para ELISA, se recomienda emparejarlo con un anticuerpo de detección dirigido a un epitopo distinto; asegúrese de que las curvas patrón incluyan proteína HIF1AN recombinante (de longitud completa o un fragmento) para confirmar la especificidad del ensayo.

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