Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-HIF1AN/FIH1 para WB y ELISA - Q9NWT6

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de HIF1AN/FIH1

• HIF1AN (inhibidor del factor inducible por hipoxia 1-alfa), también llamado factor inhibidor de HIF-1 (FIH-1), es una hidroxilasa de asparagina que regula la respuesta a la hipoxia.
• Bajo normoxia, hidroxila HIF-1α en Asn-803 en el dominio C-terminal de transactivación, bloqueando el reclutamiento de los coactivadores p300/CBP y reprimiendo así la transcripción de genes inducibles por hipoxia.
• Actúa como un sensor directo de oxígeno; su actividad hidroxilasa requiere oxígeno molecular, hierro y 2-oxoglutarato, vinculando la tensión de oxígeno celular con la estabilidad y actividad de HIF-1α.
• Más allá de HIF-1α, HIF1AN hidroxila residuos de asparagina, aspartato e histidina en dominios de repetición de anquirina (ARD) de diversas proteínas, incluyendo NFKB1, NOTCH1, ASB4 y TNKS2, modulando vías de señalización más allá de la hipoxia.
• Regula negativamente la señalización Notch al hidroxilar NOTCH1, lo que acelera la diferenciación miogénica; por el contrario, la hidroxilación de ASB4 promueve positivamente la diferenciación vascular.
• La distribución subcelular incluye tanto el núcleo como el citoplasma, con acumulación perinuclear, reflejando sus roles en la regulación transcripcional y las interacciones proteicas citoplasmáticas.
• Clasificado como una dioxigenasa y oxidoreductasa dependiente de hierro; su sitio activo contiene un centro de hierro mononuclear esencial para la catálisis.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre prácticamente toda la proteína HIF1AN (residuos 1–349), que abarca el dominio catalítico JmjC; este diseño se espera que genere anticuerpos que reconozcan múltiples epítopos, ayudando a la detección en ensayos desnaturalizantes y nativos.
• Para Western blot, se anticipa una banda alrededor de 40–41 kDa; la inclusión de un lisado celular normóxico (p. ej., HeLa, HEK293) como control positivo y una muestra tratada con hipoxia para evaluar los efectos dependientes de la hidroxilación de HIF-1α puede ser informativa.
• Al realizar ELISA, considere recubrir con HIF1AN recombinante o un péptido de HIF-1α; un ELISA sándwich emparejado con un anticuerpo de captura específico para un epítopo distinto podría aumentar la especificidad.
• La reactividad cruzada predicha con HIF1AN de ratón está respaldada, pero el rendimiento debe confirmarse utilizando los extractos de tejidos o celulares apropiados.
• Las diluciones óptimas del anticuerpo y las condiciones del ensayo deben determinarse empíricamente para cada sistema experimental.

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