Anticuerpo policlonal de conejo Anti-HIF1AN/FIH1 [Validado por KO] para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9NWT6

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de HIF1AN

• El inhibidor alfa del factor 1 inducible por hipoxia (HIF1AN), también conocido como Factor inhibidor de HIF-1 (FIH-1) y asparaginahidroxilasa del factor inducible por hipoxia, es una enzima dioxigenasa.
• HIF1AN hidroxila HIF-1 alfa en la asparagina 803 del dominio de transactivación C-terminal, actuando como sensor de oxígeno para regular la respuesta hipóxica.
• En condiciones normóxicas, esta hidroxilación previene la interacción de HIF-1 con coactivadores transcripcionales como CBP/p300, reprimiendo así la expresión de genes inducibles por hipoxia.
• Más allá de HIF, HIF1AN hidroxila residuos de asparagina, aspartato e histidina dentro de los dominios de repetición de anquirina de diversos sustratos (por ejemplo, NFKB1, NOTCH1, ANK1, TNKS2), influyendo en múltiples vías de señalización.
• Regula negativamente la actividad de NOTCH1, acelerando la diferenciación miogénica, y regula positivamente la actividad de ASB4 para promover la diferenciación vascular.
• HIF1AN se localiza predominantemente en el núcleo, pero también se encuentra en el citoplasma y la región perinuclear.
• Palabras clave adicionales incluyen dioxigenasa, unión a hierro, unión a metales, oxidorreductasa y acetilación, que reflejan sus propiedades catalíticas y reguladoras.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aa 1-349, casi longitud completa) puede generar anticuerpos policlonales que reconocen múltiples epitopos, lo que potencialmente mejora la sensibilidad de detección.
• Para Western blot, se espera una banda específica cerca de 41 kDa; se recomienda encarecidamente la validación por eliminación génica (KO) para confirmar la especificidad del anticuerpo.
• En IHC-P, optimice la recuperación de antígenos (por ejemplo, tampón de citrato pH 6.0) y valide la tinción en muestras de tejido relevantes.
• Para IF/ICC, fije las células con paraformaldehído y permeabilícelas con Tritón X-100; confirme la tinción en células de control positivo apropiadas.
• Para IP, use perlas de agarosa Protein A/G estándar para IgG de conejo; incluya un control de isotipo de IgG.
• Para ELISA, titule el anticuerpo como reactivo de captura o detección y valídelo en la matriz de muestra correspondiente.
• La reactividad cruzada reportada con ratón y rata sugiere epitopos conservados; no obstante, verifique la alineación de secuencias por especie para su aplicación específica.

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