Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Histonas H3.3 para WB, IHC-P, ELISA, ChIP, ChIP-seq - P84243

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3.3

• Variante de histona H3 que reemplaza a la H3 convencional en los nucleosomas de genes activamente transcritos, sirviendo como la forma predominante de H3 en células no divididas y depositándose independientemente de la síntesis de ADN.
• Componente central de los nucleosomas, envolviendo y compactando el ADN en cromatina para restringir la accesibilidad de la plantilla; por lo tanto, es central en la regulación de la transcripción, reparación del ADN, replicación del ADN y estabilidad cromosómica.
• Sujeta a un complejo conjunto de modificaciones postraduccionales (acetilaciones, metilaciones, fosforilaciones, etc.) que constituyen el código de histonas, regulando la dinámica de la cromatina y la expresión génica.
• Se localiza exclusivamente en el núcleo y los cromosomas, enriquecida en regiones de desplazamiento nucleosómico a lo largo de los cuerpos génicos, marcando la cromatina transcripcionalmente activa.
• Codificada por dos genes, H3-3A (H3F3A) y H3-3B (H3F3B), que producen productos proteicos idénticos; distinta de las variantes canónicas de H3 dependientes de replicación.
• Asociada con variantes de enfermedad vinculadas a discapacidad intelectual y trastornos del desarrollo, subrayando su papel epigenético crítico.
• Altamente conservada en vertebrados, con un peso molecular predicho de aproximadamente 15,328 Da, aunque a menudo se observa migrando alrededor de 15–17 kDa en SDS-PAGE debido a las MPT.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 57–136 de la Histona H3.3 humana, una región involucrada en las interacciones del nucleosoma; este epítopo puede ser conformacionalmente sensible—considere probar en condiciones nativas y desnaturalizantes.
• Para WB, se espera una banda alrededor de 15 kDa; valide en su sistema de muestra específico y utilice controles de carga apropiados (por ejemplo, H3 total o proteínas de mantenimiento).
• Dada la reactividad cruzada reportada con Humano, Ratón, Rata y una amplia gama de otras especies, es recomendable realizar pruebas piloto en modelos no estándar.
• En ChIP y ChIP-seq, optimice las condiciones de reticulación y fragmentación; el rendimiento del anticuerpo debe verificarse con regiones de control positivo (gen activo) y negativo (locus silencioso).
• Para IHC-P, la recuperación del antígeno y la dilución del anticuerpo deben determinarse empíricamente; se espera un patrón de tinción nuclear.

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