PolymAb® Policlonial de Conejo Anti-Histona H4 para WB, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - P62805

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H4

• La Histona H4 es una de las cuatro proteínas histonas centrales (H2A, H2B, H3, H4) que forman el octámero del nucleosoma, envolviendo aproximadamente 147 pares de bases de ADN y compactando el genoma en cromatina.
• Como componente central del nucleosoma, la H4 cumple un papel central en la regulación de la accesibilidad del ADN para la transcripción, replicación y reparación, así como para mantener la estabilidad cromosómica.
• En humanos, la H4 está codificada por 14 genes casi idénticos (H4C1–H4C16) agrupados en múltiples loci cromosómicos, que producen una proteína conservada de 103 aminoácidos.
• La H4 se localiza exclusivamente en el núcleo y los cromosomas, donde está sujeta a modificaciones postraduccionales extensas (acetilación, metilación, fosforilación, citrulinación, ubiquitinación, etc.) que constituyen el "código de histonas" para gobernar la dinámica de la cromatina.
• Las modificaciones en la cola N-terminal (aa 1–20) son críticas para la regulación génica; por ejemplo, la acetilación en lisinas específicas se correlaciona con transcripción activa, mientras que la metilación puede señalizar tanto activación como represión dependiendo del residuo.
• Las alteraciones en los genes de H4 o en las marcas regulatorias están vinculadas a enfermedades; mutaciones raras causan fenotipos neurodesarrolladores que incluyen discapacidad intelectual, lo que resalta la naturaleza esencial de la histona H4 en el desarrollo.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno se dirige a los aminoácidos 1–100, que abarcan la cola N-terminal y el dominio globular; tenga en cuenta que el reconocimiento del epítopo N-terminal puede verse afectado por modificaciones postraduccionales densas en algunos contextos de cromatina.
• Para Western blot (WB), se espera una banda fuerte de ~11 kDa; incluya muestras de histonas extraídas con ácido como control positivo para enriquecer proteínas básicas.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC) e inmunohistoquímica (IHC-P), la cromatina compactada en regiones heterocromáticas puede enmascarar el epítopo; protocolos de digestión suave con DNasa o permeabilización leve pueden mejorar la detección.
• Para inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), valide la capacidad del anticuerpo para enriquecer nucleosomas modificados frente a no modificados en condiciones de entrecruzamiento y nativas, ya que la accesibilidad del epítopo varía con la compactación de la cromatina.
• Se espera reactividad cruzada con ratón y rata dada la alta conservación de la secuencia (la H4 de humano/ratón es idéntica); sin embargo, confirme siempre la especificidad en la especie y aplicación correspondiente.

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