Anticuerpo Policlonal Anti-HLA Clase 1 ABC para WB, IHC-P, ELISA - P04439 / P01889 / P10321

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del HLA Clase 1 ABC

• La cadena alfa de clase I del HLA (HLA-A, -B, -C) constituye la cadena pesada de la molécula clásica del complejo mayor de histocompatibilidad clase I (MHCI). Se asocia no covalentemente con la beta-2 microglobulina (B2M) para presentar péptidos procesados intracelulares en la superficie celular para la vigilancia inmunitaria.
• En complejo con la B2M, las moléculas de clase I del HLA muestran principalmente péptidos derivados de virus y tumores (8-13 residuos) a los receptores de células T alfa-beta (TCR) en las células T CD8+, guiando las respuestas de las células T citotóxicas específicas de antígeno para eliminar células infectadas o transformadas. Referencias relacionadas: PMID:10449296, PMID:12138174, PMID:12393434
• Además, las moléculas de clase I del HLA presentan autopéptidos derivados de secuencias de señal de proteínas secretadas o de membrana, contribuyendo a la tolerancia de las células T y la prevención de la autoinmunidad. Referencias relacionadas: PMID:25880248, PMID:7506728, PMID:7679507
• Los alelos del HLA altamente polimórficos determinan los motivos de unión a péptidos; por ejemplo, el HLA-A*02:01 (el alelo más común en las poblaciones humanas) presenta epítopos virales inmunodominantes como la proteína de matriz de IAV (GILGFVFTL) y el gag-pol del VIH-1 (ILKEPVHGV), caracterizados por anclajes hidrofóbicos en las posiciones 2 y en el extremo C-terminal.
• Las moléculas de clase I del HLA son glucoproteínas de membrana integrales localizadas en la membrana celular y la membrana del retículo endoplasmático, donde ocurre la carga de péptidos y el control de calidad.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, formación de enlaces disulfuro, fosforilación y ubiquitinación; estas regulan la estabilidad, el tráfico y el reconocimiento inmunitario.
• Se expresan ubicuamente en casi todas las células nucleadas; las moléculas de clase I del HLA son fundamentales para la homeostasis del sistema inmunitario y la discriminación entre lo propio y lo extraño.
• Los anticuerpos de este producto se dirigen a una región N-terminal conservada (aa 1-100) común a HLA-A, HLA-B y HLA-C, lo que permite un reconocimiento amplio de las moléculas clásicas del MHC de clase I.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Diseño del inmunógeno: El inmunógeno corresponde a un péptido sintético que cubre los aminoácidos 1-100 del HLA-A, -B y -C humano (basado en NP_001229687.1). Esta región N-terminal incluye el dominio extracelular de unión a péptidos, lo que garantiza la reactividad con las tres moléculas clásicas del MHC de clase I. Para la discriminación de alelos específicos, considere el uso de anticuerpos específicos de alelo.
• Western blotting (WB): En condiciones reductoras, se espera una banda alrededor de 40 kDa. Valide en lisados celulares humanos apropiados (p. ej., linfocitos, líneas celulares tumorales) con perfiles de expresión de HLA conocidos.
• Inmunohistoquímica (IHC-P): Debido a la naturaleza transmembrana del objetivo, la recuperación de antígenos mediante recuperación de epítopos inducida por calor (HIER) en tampón de citrato (pH 6,0) puede mejorar la detección. Optimice la dilución del anticuerpo utilizando tejidos de control positivos (p. ej., amígdala, bazo) y negativos.
• ELISA: Adecuado para ELISA directo o sándwich; combinar con anticuerpos de detección que reconozcan la beta-2 microglobulina o alelos específicos del HLA. Valide con proteínas recombinantes de HLA o complejos naturales de MHC de clase I.

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