Anticuerpo Monoclonal Anti-HLA-DQA1 para WB, IHC-P, ELISA - P01909

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de HLA-DQA1

• HLA-DQA1 codifica la cadena alfa de la molécula HLA-DQ (MHC de clase II), un heterodímero compuesto por subunidades alfa (DQA1) y beta (DQB1) que se encuentra en las células presentadoras de antígenos (APC) y ciertas células epiteliales.
• Como molécula clásica de MHC de clase II, el heterodímero DQ presenta antígenos peptídicos exógenos (10–30 residuos) que han sido internalizados a través de la vía endocítica a las células T colaboradoras CD4+, desempeñando así un papel central en la inmunidad adaptativa.
• En el retículo endoplasmático, el heterodímero DQA1/DQB1 se ensambla con el trímero de la cadena invariante (CD74), formando un complejo nonamérico que se transporta a endosomas y lisosomas donde CD74 se degrada secuencialmente, dejando el fragmento CLIP que se intercambia por péptidos antigénicos facilitado por HLA-DM.
• HLA-DQA1 es una glucoproteína transmembrana con una topología de membrana de tipo I típica, que contiene un dominio de unión a péptidos extracelular, un dominio similar a la inmunoglobulina, una hélice transmembrana de un solo paso y una cola citoplasmática corta.
• A nivel subcelular, la proteína trafica a través de la membrana del RE, del aparato de Golgi, de la red trans-Golgi, de las membranas endosómicas/lisosómicas y, en última instancia, reside en la membrana plasmática, lo que refleja su papel dinámico en el procesamiento y la presentación de antígenos.
• Las palabras clave de UniProt (P01909) destacan su participación esencial en la inmunidad adaptativa, la formación del complejo MHC II y señalan modificaciones postraduccionales que incluyen la formación de enlaces disulfuro y la glicosilación N-ligada, las cuales son críticas para su estructura y función.
• Los polimorfismos en HLA-DQA1, solos o en combinación con HLA-DQB1, están fuertemente asociados con la enfermedad celíaca (de ahí el alias CELIAC1) y otros trastornos autoinmunes, lo que subraya su relevancia clínica.
• Aparte de las APC profesionales, las moléculas de MHC de clase II se expresan constitutivamente en las células epiteliales gastrointestinales, contribuyendo a la vigilancia inmune local, una característica distintiva observada en el tracto gastrointestinal.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo monoclonal se generó contra un péptido sintético correspondiente a una secuencia interna (aa 155-254) del HLA-DQA1 humano, lo que sugiere el reconocimiento de un epítopo lineal probablemente expuesto en condiciones desnaturalizantes, lo que respalda su uso en WB.
• Para WB, considere ejecutar lisados celulares totales o fracciones enriquecidas en membranas de células inmunes humanas, de ratón o rata (p. ej., células B Raji, células dendríticas) en condiciones reductoras; se espera una banda cercana a 28 kDa para la cadena alfa glicosilada.
• En IHC-P, la recuperación de antígenos puede optimizar la tinción; pruebe en tejido humano de amígdala, bazo o intestino fijado en formol e incluido en parafina, así como en órganos linfoides de ratón/rata, y valide con los controles negativos apropiados.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir la optimización del tampón de recubrimiento y el sistema de detección; considere usar el anticuerpo en un formato ELISA sándwich con un anticuerpo de detección emparejado si está disponible.
• Dada la reactividad cruzada con ratón y rata, este anticuerpo puede emplearse en modelos traslacionales de autoinmunidad, trasplante o enfermedades infecciosas, pero siempre confirme la especificidad en el sistema experimental deseado.

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