Anticuerpo monoclonal anti-HLA-DR para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P01903

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la cadena alfa de HLA-DR

• HLA-DRA (también conocido como HLA-DRA1) es un gen ubicado en el cromosoma 6 que codifica la cadena alfa de las moléculas del MHC de clase II, con un peso molecular previsto de aproximadamente 29 kDa (la forma madura alcanza alrededor de 26 kDa después de la escisión del péptido señal).
• La cadena alfa codificada se ensambla con la cadena beta HLA-DRB para formar heterodímeros funcionales de HLA-DR que presentan péptidos antigénicos a las células T CD4 positivas, dirigiendo las funciones efectoras de los linfocitos T colaboradores y la activación de los macrófagos (PubMed:15265931, PubMed:15322540, PubMed:17334368). Referencias relacionadas: PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• La carga de antígenos peptídicos sigue dos modos de procesamiento distintos: «unir primero, cortar/recortar después» para los péptidos derivados de patógenos y «cortar primero, unir después» para los péptidos propios, siendo el residuo de anclaje N-terminal (normalmente un aminoácido hidrofóbico grande) esencial para la unión al MHCII (PubMed:25413013, PubMed:8145819). Referencias relacionadas: PMID:25413013 PMID:8145819
• En el microambiente tumoral, HLA-DR presenta antígenos derivados de tumores capturados mediante fagocitosis o macropinocitosis por las CPA, facilitando las respuestas antitumorales de las células T CD4+ (PubMed:31495665). Referencias relacionadas: PMID:31495665
• El complejo HLA-DR circula a través de compartimentos endosómicos y lisosómicos, incluidos los autofagolisosomas, donde presenta péptidos procedentes de proteínas intracelulares derivadas de la autofagia, un mecanismo fundamental para la selección de células T tímicas y la tolerancia central (PubMed:17182262, PubMed:23783831). Referencias relacionadas: PMID:17182262 PMID:23783831
• HLA-DRA se expresa a nivel proteico en células profesionales presentadoras de antígenos —macrófagos, células dendríticas y células B— y en células epiteliales tímicas, en consonancia con su función en la inmunidad adaptativa (PubMed:15322540, PubMed:23783831, PubMed:31495665). Referencias relacionadas: PMID:15322540 PMID:23783831 PMID:31495665
• HLA-DRA es una glucoproteína transmembrana que presenta enlaces disulfuro y posible ubiquitinación (enlace isopeptídico), lo que puede influir en su estabilidad y tráfico durante la formación de la sinapsis inmunológica.

Guía experimental y consejos técnicos

• Diseño del inmunógeno: El anticuerpo se generó contra un péptido ubicado dentro de los aminoácidos 100-200 de HLA-DRA humano, por lo que se espera que reconozca el ectodominio maduro; la reactividad cruzada con otras especies no está garantizada, pero puede comprobarse si es necesario.
• Western blot (WB): Utilice condiciones reductoras y cargue un marcador de peso molecular; la banda detectada debería aparecer a aproximadamente 29 kDa. Incluya un lisado de control positivo de líneas celulares B humanas (por ejemplo, Raji) o de PBMC.
• Inmunofluorescencia (IF/ICC): Permeabilice las células con Triton X-100 al 0,1 % para permitir el acceso del anticuerpo a los epítopos intracelulares; HLA-DR se localiza principalmente en la superficie celular y en compartimentos endocíticos. Utilice CPA humanas o líneas celulares que expresen HLA-DR como controles positivos.
• Inmunohistoquímica en parafina (IHC-P): Realice una recuperación antigénica inducida por calor en tampón citrato (pH 6,0) antes de la incubación; valide la tinción en tejidos linfoides humanos (amígdalas, bazo) conocidos por expresar MHCII.
• ELISA: El anticuerpo puede utilizarse en un formato de ELISA tipo sándwich con un anticuerpo de detección compatible; valide utilizando proteína HLA-DR recombinante o placas recubiertas con péptidos.

CamelBio: su puente integral de abastecimiento

CamelBio ofrece una plataforma integral y simplificada para el abastecimiento de materias primas para DIV, incluido este anticuerpo monoclonal anti-HLA-DR validado y reactivos complementarios, como pares de antígenos compatibles y anticuerpos de detección. Nuestro catálogo especializado en inmunología apoya el desarrollo de ensayos diagnósticos dirigidos a moléculas del MHC de clase II, y nuestros equipos técnicos pueden ayudar a personalizar los formatos de los reactivos y ampliar el suministro para cumplir con los plazos de su proyecto.