Anticuerpo monoclonal de conejo anti-HLA-DRA para WB, IHC-P, ELISA - P01903

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de HLA-DRA

• HLA-DRA es la cadena alfa del MHC clase II, también conocida como antígeno MHC clase II DRA, y se empareja con la cadena beta HLA-DRB para formar el complejo presentador de antígenos.
• En complejo con HLA-DRB, presenta péptidos antigénicos en CPA profesionales para el reconocimiento por células T CD4+, guiando las funciones efectoras de los linfocitos T colaboradores, incluyendo la respuesta inmune mediada por anticuerpos y la activación de macrófagos. Referencias relacionadas: PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• Normalmente presenta antígenos peptídicos extracelulares de 10 a 30 aminoácidos derivados de la proteólisis de antígenos endocitados en los lisosomas. Referencias relacionadas: PMID:8145819
• En el microambiente tumoral, presenta péptidos antigénicos generados principalmente en CPA residentes en el tumor, probablemente a través de la fagocitosis de células tumorales apoptóticas o la macropinocitosis de proteínas tumorales secretadas. Referencias relacionadas: PMID:31495665
• Presenta péptidos derivados de proteínas intracelulares atrapadas en autolisosomas después de la macroautofagia, un mecanismo relevante para la selección de células T en el timo y la tolerancia inmune central. Referencias relacionadas: PMID:17182262 PMID:23783831
• La selección de epítopos inmunodominantes sigue dos modos de procesamiento: 'unirse primero, cortar/recortar después' para péptidos derivados de patógenos y 'cortar primero, unirse después' para autoantígenos/péptidos propios. Referencias relacionadas: PMID:25413013
• El residuo ancla en la posición 1 del extremo N-terminal del péptido, generalmente un residuo hidrofóbico grande, es esencial para la interacción de alta afinidad con las moléculas MHCII. Referencias relacionadas: PMID:8145819
• HLA-DRA se localiza en la membrana celular, la membrana del retículo endoplásmico, las membranas de endosomas tempranos/tardíos, la membrana del lisosoma y la membrana del autolisosoma.
• Se expresa en CPA profesionales (macrófagos, células dendríticas, células B) y en células epiteliales tímicas. Referencias relacionadas: PMID:15322540 PMID:23783831 PMID:31495665
• Es una glicoproteína con puentes disulfuro y una hélice transmembrana; sufre modificaciones postraduccionales esenciales para la estabilidad y función del MHCII.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 100-200 de la HLA-DRA humana; para la validación analítica, considere usar proteína recombinante de longitud completa o lisados celulares que expresen complejos MHC clase II nativos.
• Para Western blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 29 kDa en condiciones reductoras; optimice la dilución del anticuerpo primario y use reactivos de detección secundarios apropiados.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), puede ser necesario el recuperación antigénica, y es recomendable validar el patrón de tinción en tejidos de control positivo como ganglio linfático o bazo.
• En ELISA, asegure una óptima adsorción con el antígeno diana y valide usando muestras de control positivo y negativo conocidas.
• Dado que este anticuerpo se generó contra una secuencia humana, confirme la reactividad cruzada cuando use muestras no humanas.

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