Anticuerpo policlonal de conejo anti-HLA-DRA para WB, IHC-P, ELISA - P01903

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de HLA-DRA

• HLA-DRA codifica la cadena alfa del antígeno de histocompatibilidad HLA de clase II, una glucoproteína heterodimérica de superficie celular que se asocia con HLA-DRB para formar el complejo MHC de clase II.
• La molécula MHCII presenta péptidos antigénicos extracelulares procesados (de 10 a 30 aminoácidos) a las células T colaboradoras CD4+, iniciando respuestas inmunitarias adaptativas como la producción de anticuerpos y la activación de macrófagos. Referencias relacionadas: PMID:15265931, PMID:15322540, PMID:17334368, PMID:8145819
• HLA-DRA se expresa en células profesionales presentadoras de antígenos, incluidos macrófagos, células dendríticas, células B y células epiteliales tímicas, en consonancia con su función en la vigilancia inmunitaria y la selección de células T. Referencias relacionadas: PMID:15322540, PMID:23783831, PMID:31495665
• A nivel subcelular, la proteína se localiza en la membrana plasmática y en compartimentos vesiculares intracelulares —retículo endoplasmático, endosomas, lisosomas y autolisosomas—, lo que refleja su transporte para la carga de antígenos.
• Entre las principales modificaciones postraduccionales se incluyen la N-glucosilación, la formación de enlaces disulfuro y la posible ubiquitinación, que contribuyen a la estabilidad y al recambio de MHCII.
• La estructura de la proteína incluye un péptido señal, dominios extracelulares, una hélice transmembrana y una cola citoplasmática; las estructuras cristalinas del heterodímero DR han mejorado la comprensión de la unión de péptidos.
• En el microambiente tumoral, HLA-DRA presenta péptidos derivados de tumores a las células T, desempeñando un papel en la inmunidad antitumoral. Referencias relacionadas: PMID:31495665
• El procesamiento autolisosomal de péptidos intracelulares por MHCII es crucial para la selección tímica de células T y la tolerancia inmunitaria central. Referencias relacionadas: PMID:17182262, PMID:23783831
• La selección de epítopos inmunodominantes sigue dos modalidades: «unirse primero, cortar/recortar después» para los péptidos derivados de patógenos y «cortar primero, unirse después» para los autoantígenos. Referencias relacionadas: PMID:25413013

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca el dominio extracelular (aa 26-216) de HLA-DRA humano, lo que permite la posible detección de conformaciones proteicas desnaturalizadas y nativas en aplicaciones como WB, IHC-P y ELISA.
• En el análisis mediante Western blot, se espera una banda de aproximadamente 29 kDa; sin embargo, la glucosilación variable puede causar un desplazamiento del peso molecular aparente. Valide el patrón de bandas en una línea celular o un lisado tisular pertinente.
• Para la inmunohistoquímica en cortes incluidos en parafina, se recomienda optimizar la recuperación antigénica. Los tejidos de control positivo incluyen ganglio linfático, bazo o amígdala humanos.
• Se ha informado reactividad cruzada con rata; para otras especies, compruebe la homología de secuencia de la región del inmunógeno antes de utilizarlo.
• En ELISA, el anticuerpo puede utilizarse para la captura o detección de HLA-DRA en sobrenadantes de cultivos celulares o lisados; considere combinarlo con anticuerpos secundarios adecuados y optimice las condiciones de recubrimiento.

CamelBio: su plataforma integral de abastecimiento

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