Anticuerpo monoclonal de conejo anti-HLA-DRB1 para WB, IHC-P, ELISA - P01911

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de HLA-DRB1

• HLA-DRB1 codifica la cadena beta de la molécula del complejo mayor de histocompatibilidad de clase II, que se empareja con la cadena alfa HLA-DRA para presentar péptidos antigénicos a los linfocitos T CD4+, organizando las respuestas inmunitarias adaptativas.
• El surco de unión a péptidos generalmente aloja antígenos extracelulares de 10 a 30 aminoácidos derivados de proteínas endocitadas, con un residuo ancla clave en la posición 1 (PubMed:8145819). Referencias relacionadas: PMID:8145819
• Además de la presentación de antígenos exógenos, HLA-DRB1 puede presentar péptidos intracelulares a través de la autofagia, un proceso importante para la selección de linfocitos T tímicos y la tolerancia central (PubMed:17182262, PubMed:23783831). Referencias relacionadas: PMID:17182262 PMID:23783831
• Subcelularmente, la proteína se localiza en la membrana celular, el retículo endoplásmico y los compartimentos endolisosomales (endosomas tardíos, lisosomas, autofagosomas), lo que refleja su función en el tráfico y el procesamiento de antígenos.
• La expresión tisular se da predominantemente en las células presentadoras de antígenos profesionales: monocitos/macrófagos, células dendríticas y linfocitos B, además de en las células epiteliales tímicas (PubMed:19830726, PubMed:23783831, PubMed:31495665). Referencias relacionadas: PMID:19830726 PMID:23783831 PMID:31495665
• HLA-DRB1 es altamente polimórfico, con cientos de variantes alélicas; alelos específicos se asocian a la presentación de epitopos distintos derivados de patógenos, lo que influye en la susceptibilidad a enfermedades infecciosas y enfermedades autoinmunes (PubMed:22327072, PubMed:29884618, PubMed:27591323). Referencias relacionadas: PMID:22327072 PMID:29884618 PMID:27591323
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales que incluyen glicosilación y formación de enlaces disulfuro, y además actúa como receptor para la entrada del virus de Epstein-Barr en los linfocitos.
• Las palabras clave biológicas principales son inmunidad adaptativa, MHC II, glicoproteína y proteína transmembranal, lo que resalta su papel central en el reconocimiento inmunitario y la señalización.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los residuos 100–200 del HLA-DRB1 humano (P01911). Esta región puede incluir porciones del dominio beta-2; tenga en cuenta su conservación entre alelos al interpretar la reactividad cruzada en los experimentos.
• Para Western blotting (WB), el peso molecular predicho es de aproximadamente 30 kDa; valide con controles positivos adecuados (por ejemplo, líneas celulares linfoblastoides o células mononucleares de sangre periférica aisladas) en condiciones reductoras.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), los métodos de recuperación de antígenos (por ejemplo, recuperación de epitopos inducida por calor en amortiguador de citrato) pueden ser necesarios para exponer el epitopo en tejidos fijados en formalina e incluidos en parafina.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo se puede usar como reactivo de captura o detección; optimice las condiciones de recubrimiento y use proteína recombinante de HLA-DRB1 o complejos péptido-HLA como estándares.
• Dado el polimorfismo de HLA-DRB1, confirme la reactividad alelo-específica si es necesario usando líneas celulares modificadas que expresen alelos definidos o mediante secuenciación.
• Como con cualquier anticuerpo monoclonal, realice diluciones en serie e incluya controles de isotipo para garantizar la especificidad y minimizar la señal de fondo.

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