Anticuerpo policlonal anti-HLA-DRB3 para WB y ELISA - P79483

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de HLA-DRB3

• HLA-DRB3 codifica la cadena beta de la molécula del MHC de clase II, que se empareja con la cadena alfa HLA-DRA para formar un heterodímero en la superficie de las células presentadoras de antígenos profesionales (APC).
• El complejo MHCII presenta antígenos peptídicos (normalmente de 10–30 aminoácidos procedentes de proteínas endocitadas) a las células T CD4+, guiando funciones efectoras de los linfocitos T colaboradores, como la inmunidad mediada por anticuerpos y la activación de macrófagos (PubMed:16148104, PubMed:19531622, PubMed:19830726). Referencias relacionadas: PMID:16148104, PMID:19531622, PMID:19830726
• El gen tiene varios alelos con repertorios de unión a péptidos distintos. El ALELO DRB3*01:01 presenta epítopos de la toxina tetánica y del HHV-6B (PubMed:19830726, PubMed:2463305, PubMed:2788702, PubMed:31020640). Referencias relacionadas: PMID:19830726, PMID:2463305, PMID:2788702, PMID:31020640
• El ALELO DRB3*02:02 presenta epítopos de la toxina tetánica, EBV, HHV-6B, el virus del dengue, IAV y los antígenos tumorales WT1, NY-ESO-1 y TP53 (PubMed:19830726, PubMed:2788702, PubMed:23569328, PubMed:31308093, PubMed:31020640, PubMed:31333679, PubMed:22929521, PubMed:19531622, PubMed:20368442, PubMed:30282837). Referencias relacionadas: PMID:19830726, PMID:2788702, PMID:23569328, PMID:31308093, PMID:31020640, PMID:31333679, PMID:22929521, PMID:19531622, PMID:20368442, PMID:30282837
• El ALELO DRB3*03:01 presenta péptidos de M. tuberculosis y HCV (PubMed:32341563, PubMed:2788702, PubMed:16148104). Referencias relacionadas: PMID:32341563, PMID:2788702, PMID:16148104
• A nivel subcelular, se localiza en la membrana celular, así como en las membranas del retículo endoplasmático, los endosomas tardíos, los lisosomas y los autofagolisosomas.
• Se expresa en APC profesionales: monocitos/macrófagos, células dendríticas y células B.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, formación de enlaces disulfuro y ubiquitinación. Palabras clave: inmunidad adaptativa, MHC II, glicoproteína, señal, transmembrana.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 30–227, lo que sugiere que el anticuerpo puede reconocer múltiples epítopos del dominio extracelular. Valide el anticuerpo en líneas de APC relevantes (por ejemplo, células B Raji y células dendríticas derivadas de monocitos) para WB y ELISA.
• Para WB, utilice SDS-PAGE reductora y cargue 20–30 µg de lisado; el peso molecular previsto es de aproximadamente 30 kDa en condiciones reductoras. Optimice el bloqueo con BSA al 5 %.
• Para ELISA, recubra con proteína recombinante o lisado celular a una concentración de 1–2 µg/mL; compruebe la reactividad cruzada frente a cadenas beta HLA-DR relacionadas.
• Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación y utilice cócteles frescos de inhibidores de proteasas para mantener la integridad del antígeno.
• Utilice un anticuerpo secundario adecuado y considere ajustar la titulación del anticuerpo primario (por ejemplo, 1:500–1:2000 para WB) para minimizar el fondo.

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