Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-HMGB1 (Validado por KO) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09429

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la proteína de alta movilidad B1 (HMGB1)

• HMGB1 (proteína de alta movilidad B1, también conocida como HMG-1) es una proteína multifuncional sensible al redox que actúa como chaperona del ADN en el núcleo, donde participa en la replicación, transcripción, remodelación de la cromatina, recombinación V(D)J, reparación del ADN y estabilidad del genoma. (PubMed:33147444) Referencias relacionadas: PMID:33147444
• Funciona como un patrón molecular asociado al peligro (DAMP) cuando se libera al espacio extracelular, mediando respuestas inflamatorias e inmunitarias al unirse a receptores como RAGE, TLR2 y TLR4. (PubMed:27362237, PubMed:34743181) Referencias relacionadas: PMID:27362237 PMID:34743181
• La actividad de HMGB1 depende de su estado redox: la forma completamente reducida actúa como quimiocina, la forma disulfuro como citocina y la forma sulfonilo promueve la tolerancia inmunológica. (PubMed:23446148, PubMed:23519706, PubMed:23994764) Referencias relacionadas: PMID:23446148 PMID:23519706 PMID:23994764
• La localización subcelular de HMGB1 es dinámica e incluye el núcleo, el cromosoma, el citoplasma, la membrana celular, el endosoma, el retículo endoplásmico y formas secretadas.
• Modificaciones postraduccionales como la acetilación, ADP-ribosilación, fosforilación y oxidación regulan la distribución subcelular y las actividades funcionales de HMGB1.
• HMGB1 se expresa de forma ubicua, con expresión confirmada en plaquetas. (PubMed:11154118) Referencias relacionadas: PMID:11154118
• La proteína participa en las interacciones huésped-virus, siendo crítica para la entrada de SARS-CoV-2 y SARS-CoV, y facilita la replicación de la gripe A, el EBV y el virus del dengue. (PubMed:33147444, PubMed:35239449) Referencias relacionadas: PMID:33147444 PMID:35239449

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 100–200 de la proteína HMGB1 humana. Se recomienda usar proteína recombinante de longitud completa o mapeo de epítopos para confirmar la especificidad de detección.
• Para transferencia Western (Western blotting), HMGB1 tiene un peso molecular predicho de ~25 kDa; pueden aparecer múltiples bandas debido a modificaciones postraduccionales o diferentes estados redox.
• En IHC-P, optimice los métodos de recuperación de antígeno y valide usando tejidos con patrones de expresión de HMGB1 conocidos (por ejemplo, amígdala, hígado). Incluya controles positivos y negativos apropiados.
• En IF/ICC, tenga en cuenta que HMGB1 puede translocarse entre el núcleo y el citoplasma en respuesta al estrés celular. Trate las células con estímulos como LPS o TNF-α para evaluar la translocación.
• Para ELISA, asegúrese de que el par de anticuerpos esté validado para el formato de ensayo elegido; la región del epítopo (100–200) debe ser accesible en la preparación del antígeno diana.

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