Anticuerpo monoclonal de conejo anti-HMGCS2 para WB, IF, IHC-P, ELISA - P54868

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de HMGCS2

• HMGCS2 cataliza el primer paso irreversible de la cetogénesis, condensando acetil-CoA y acetoacetil-CoA para formar 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA (HMG-CoA). Esta HMG-CoA también puede ser convertida por la HMG-CoA reductasa en mevalonato, vinculando las vías cetogénica y colesterogénica.
• La enzima se localiza en la matriz mitocondrial, en consonancia con su función en la producción hepática de cuerpos cetónicos.
• HMGCS2 se expresa predominantemente en el hígado, y los análisis cuantitativos muestran niveles más de 200 veces superiores a los de otros tejidos. Se detecta una baja expresión en colon, riñón, testículo y páncreas, y una expresión muy baja en corazón y músculo esquelético; está ausente en el cerebro (PubMed:16940161, PubMed:21952825, PubMed:7893153). Cabe destacar que los datos de transcripción indican la expresión más alta en corazón y músculo esquelético, lo que sugiere una regulación postranscripcional o diferencias entre isoformas. Referencias relacionadas: PMID:16940161 PMID:21952825 PMID:7893153
• El corte y empalme alternativo produce múltiples isoformas que, junto con la acetilación y fosforilación postraduccionales, contribuyen a las bandas proteicas observadas de 50, 52 y 56 kDa.
• Las mutaciones en HMGCS2 están relacionadas con trastornos metabólicos (variante asociada a enfermedad), lo que subraya su importancia clínica.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se diseñó utilizando un péptido de la región C-terminal (aa 400-500) de HMGCS2 humano, una estrategia que puede mejorar la especificidad. Al adaptar este enfoque, alinee las secuencias entre especies si se desea reactividad cruzada.
• En la transferencia Western, observe múltiples bandas entre 50 y 56 kDa debido a las isoformas y modificaciones; incluya marcadores de peso molecular y controles positivos adecuados (por ejemplo, lisado de hígado).
• Para la inmunohistoquímica (IHC-P), puede ser necesaria la recuperación antigénica; se espera una tinción mitocondrial. La inmunofluorescencia (IF/ICC, IF-P) debería revelar un patrón mitocondrial punteado.
• El anticuerpo se ha probado en muestras humanas, de ratón y de rata, por lo que es adecuado para estudios comparativos en modelos de roedores de cetogénesis o metabolismo hepático.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir la optimización de las condiciones de recubrimiento y de las concentraciones de anticuerpo para el analito específico.

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