Anticuerpo policlonal de conejo anti-HNF1α para WB, ELISA - P20823

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de HNF1α

• El factor nuclear 1-alfa de hepatocitos (HNF1α) es un factor de transcripción codificado por el gen HNF1A; el empalme alternativo produce múltiples isoformas (Palabras clave de UniProt KB: Empalme alternativo).
• Funciona como un activador transcripcional que regula la expresión génica específica de tejido, principalmente en células de los islotes pancreáticos e hígado (Por similitud). Se une al palíndromo invertido 5'-GTTAATNATTAAC-3' para controlar la transcripción de genes diana (PubMed:10966642, PubMed:12453420). Referencias relacionadas: PMID:10966642 PMID:12453420
• Activa la transcripción de enzimas del citocromo P450 como CYP1A2, CYP2E1 y CYP3A11, vinculándolo con vías del metabolismo de fármacos (Por similitud).
• Desempeña un papel crucial en la transcripción del gen del virus de la hepatitis B (VHB) y la replicación del ADN al actuar en sinergia con NR5A2 para potenciar la actividad del potenciador viral II (ENII) (Infección microbiana).
• La localización subcelular es exclusivamente nuclear, consistente con su función como factor de transcripción que se une al ADN (UniProt: Núcleo).
• Se expresa predominantemente en el hígado, donde controla una red de genes específicos de hepatocitos (Especificidad de tejido UniProt: Hígado).
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación y conjugación con ubiquitina (Palabras clave: Fosfoproteína, Conjugación Ubl), y se sabe que la proteína contiene un dominio homeobox (Palabras clave: Homeobox, Unión a ADN).
• Clínicamente, las mutaciones en HNF1A se asocian con diabetes de inicio en la madurez tipo 3 (MODY3) y diabetes mellitus (Palabras clave: Diabetes mellitus, Variante de enfermedad).

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 30–130 del HNF1α humano, que abarca porciones del dominio N-terminal; considere la posible reactividad cruzada con otras proteínas que contengan homeobox y valide la especificidad utilizando controles basados en knockout o siRNA.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de aproximadamente 67 kDa; utilice lisados de control positivo de líneas celulares de hígado o de islotes pancreáticos (por ejemplo, HepG2 o MIN6) para confirmar la banda. Las bandas migradas pueden desplazarse debido a fosforilación u otras modificaciones; el tratamiento con fosfatasa puede ayudar a verificar el estado de modificación.
• En aplicaciones de ELISA, optimice las concentraciones del antígeno de recubrimiento y las condiciones de detección; incluya proteína o péptido recombinante de HNF1α en ensayos de competición para evaluar la especificidad del anticuerpo.
• Se informa que el anticuerpo presenta reactividad cruzada con HNF1α de ratón y rata; si se utiliza en otras especies, realice experimentos de validación adicionales para confirmar la reactividad.
• Dada la implicación de HNF1α en la biología del virus de la hepatitis B, este anticuerpo puede ser útil para estudiar las interacciones huésped-VHB; sin embargo, son necesarios modelos virales y controles apropiados.

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