Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Homer1 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q86YM7

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Homer1

• Homer1 es una proteína de andamiaje de densidad postsináptica codificada por el gen HOMER1. Se producen múltiples isoformas (por ejemplo, isoformas 1 y 3) mediante splicing alternativo, actuando la isoforma 3 como un regulador negativo dominante.
• Se une y entrecruza los receptores metabotrópicos de glutamato del grupo I (GRM1 y GRM5) con proteínas intracelulares como ITPR1, SHANK1 y SHANK3, acoplando la activación de receptores de superficie con la liberación de calcio intracelular desde el retículo endoplásmico.
• La isoforma 1 regula el tráfico y la expresión en superficie de GRM5, mientras que la isoforma 3 compite dinámicamente con la isoforma 1 para ajustar finamente la función del glutamato metabotrópico sináptico y participa en cambios estructurales durante la plasticidad neuronal duradera y el desarrollo.
• A través de su asociación con SHANK1, Homer1 forma un complejo de alto orden crítico para la integridad estructural y funcional de las espinas dendríticas (Por similitud).
• Más allá del sistema nervioso, Homer1 regula negativamente la activación de células T al inhibir la vía calcineurina-NFAT, compitiendo con la calcineurina por la unión a la proteína NFAT y evitando la desfosforilación y activación de NFAT. Referencias relacionadas: PMID:18218901
• A nivel subcelular, Homer1 se localiza predominantemente en el citoplasma, la densidad postsináptica, las sinapsis excitadoras y las espinas dendríticas de las neuronas.
• La proteína está sujeta a modificaciones postraduccionales como acetilación y fosforilación, y contiene un dominio de enrollamiento de hélice (coiled-coil) importante para la multimerización.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 170–354, una región que puede incluir secuencias de enrollamiento de hélice o enlazadoras; el anticuerpo puede reconocer todas las isoformas de Homer1 que compartan este epítopo.
• Para Western blot, use condiciones reductoras y un control positivo adecuado como lisado de cerebro humano o de rata; el tamaño de banda esperado es de aproximadamente 40 kDa, aunque la migración específica de la isoforma puede variar.
• En inmunofluorescencia e inmunohistoquímica, optimice los protocolos de fijación/permeabilización y, para secciones de parafina, determine las condiciones apropiadas de recuperación de antígeno para preservar la accesibilidad del epítopo.
• Considere verificar la especificidad de la isoforma mediante knockdown con siRNA o construcciones específicas de la isoforma si es necesario discriminar entre Homer1A, Homer1B y Homer1C.
• El rendimiento del anticuerpo en ELISA puede evaluarse usando proteína recombinante Homer1 o lisados celulares, prestando atención a la composición de los tampones de bloqueo y lavado para reducir la unión inespecífica.

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