Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-HPRT1 para WB y ELISA - P00492

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de la HPRT1

• La hipoxantina-guanina fosforibosiltransferasa (HPRT1) cataliza la conversión de hipoxantina a IMP y guanina a GMP a través de la vía de recuperación de purinas, reciclando bases de purina en nucleótidos.
• La HPRT1 transfiere el grupo 5-fosforibosilo del 5-fosforibosilpirofosfato (PRPP) a las bases de purina, desempeñando un papel central en la generación de nucleótidos de purina para la síntesis de ácidos nucleicos y la energía celular.
• La HPRT1 es un miembro de la familia de purina/pirimidina fosforibosiltransferasas, está conservada entre especies y está codificada por el gen HPRT1 (HGPRT) en el cromosoma X.
• A nivel subcelular, la HPRT1 se localiza principalmente en el citoplasma, donde accede a sus sustratos para las reacciones de recuperación.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación y formación de enlaces isopéptidos (ubiquitinación), que pueden regular su actividad o estabilidad.
• Las mutaciones en HPRT1 causan el síndrome de Lesch-Nyhan, un trastorno neurológico grave, y están asociadas a la gota por sobreproducción de purinas debido a la deficiencia en la vía de recuperación.
• La enzima requiere magnesio como cofactor y se une a nucleótidos, lo que refleja su papel en la transferencia de fosforibosilo.

Guía experimental y consejos técnicos

• El diseño del inmunógeno basado en la región central de HPRT1 (aa 119-218) puede proporcionar especificidad para el objetivo, evitando al mismo tiempo la variabilidad N-terminal o C-terminal. Se recomienda realizar pruebas en las especies relevantes (humano, ratón, rata) debido a la alta conservación de la secuencia.
• Para Western blot, la banda esperada es de aproximadamente 25 kDa; utilice marcadores de peso molecular adecuados. Si requiere la validación por knockout, incluya lisados de células HPRT1 KO para confirmar la especificidad.
• En ELISA, se puede emplear un ensayo indirecto estándar con el péptido o la proteína HPRT1 recombinante; considere optimizar las condiciones de recubrimiento y la dilución del anticuerpo.
• Dado que la HPRT1 es ubicua, confirme la expresión en su tipo de muestra; puede utilizarse como control de carga en algunos experimentos.
• La reactividad cruzada con HPRT1 de ratón y rata permite estudios traslacionales; realice la validación en el sistema modelo deseado.

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