Anticuerpo Policlonal Anti-HSD3B1 para WB, IF-P, ELISA - P14060

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de HSD3B1

• HSD3B1 es una enzima bifuncional perteneciente a la familia 3-beta hidroxiesteroide deshidrogenasa/ isomerasa. Cataliza la oxidación e isomerización de precursores de esteroides 3β-hidroxi-Δ5 a 3-oxo-Δ4-esteroides, un paso esencial en la biosíntesis de todas las principales hormonas esteroides. Esto incluye la conversión de pregnenolona a progesterona, 17α-hidroxipregnenolona a 17α-hidroxiprogesterona, dehidroepiandrosterona (DHEA) a 4-androstenediona, y androstenediol a testosterona. Referencias relacionadas: PMID:1401999 PMID:2139411
• Más allá de la esteroidogénesis de novo, HSD3B1 regula la biodisponibilidad local de andrógenos al interconvertir andrógenos 5α-reducidos activos e inactivos. Inactiva eficientemente la dihidrotestosterona (DHT) convirtiéndola en 5α-androstanediol, un metabolito que no se une al receptor de andrógenos. Referencias relacionadas: PMID:1401999 PMID:2139411
• HSD3B1 se ancla a las membranas intracelulares a través de una hélice transmembrana de paso único y se localiza tanto en la membrana del retículo endoplásmico como en la membrana mitocondrial.
• La enzima se expresa predominantemente en placenta y piel, y también se encuentra en niveles significativos en el tejido de la glándula mamaria.
• Se clasifica bajo múltiples palabras clave funcionales, incluyendo enzima multifuncional, oxidorreductasa dependiente de NAD/NADP, isomerasa, metabolismo de esteroides y metabolismo de lípidos, lo que destaca su papel central en las vías esteroidogénicas y metabólicas.
• Según UniProt, se espera que HSD3B1 utilice NAD+ como el donante de electrones preferido para su actividad deshidrogenasa y NADPH para la actividad reductasa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la proteína HSD3B1 humana de longitud completa (aminoácidos 1-290), lo que puede generar una respuesta policlonal dirigida a múltiples epítopos. Para Western blot, considere usar lisados de control positivo de tejido placentario o mamario, o líneas celulares con alta expresión endógena de HSD3B1 (por ejemplo, células de cáncer de mama o próstata).
• El peso molecular predicho es de aproximadamente 42 kDa. Debido a su localización en membrana, asegure una solubilización suficiente utilizando tampones de lisis apropiados que contengan detergentes (por ejemplo, tampón RIPA) y evite hervir las muestras a temperaturas excesivamente altas para prevenir la agregación.
• Para inmunofluorescencia (IF-P), incluya un paso de permeabilización (por ejemplo, 0.1% Triton X-100) para permitir el acceso del anticuerpo a los compartimentos de membrana intracelular. La tinción conjunta con marcadores de ER o mitocondriales puede validar la localización subcelular esperada.
• El anticuerpo ha confirmado reactividad cruzada con muestras humanas, de ratón y de rata. Verifique la idoneidad para otras especies comprobando la homología de secuencia y realizando un experimento piloto.
• Como anticuerpo policlonal, la consistencia de lote a lote puede variar. Considere el almacenamiento en alícuotas y pruebas de gradiente al optimizar para nuevos ensayos, y valide el rendimiento en su propio sistema de muestras.

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