Anticuerpo policlonal de conejo anti-HSP47/SERPINH1 para WB, IF/ICC, ELISA - P50454

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de HSP47/SERPINH1

• HSP47, también conocida como Serpina H1, es una proteína de choque térmico de 47 kDa (coligina) perteneciente a la superfamilia de las serpinas y está codificada por el gen SERPINH1 en humanos.
• Funciona como una chaperona molecular específica de colágeno en el retículo endoplásmico, esencial para la biosíntesis, plegamiento y trimerización adecuados del colágeno.
• La proteína reside en el lumen del retículo endoplásmico, donde se asocia transitoriamente con intermediarios de procolágeno para prevenir la agregación prematura.
• Los nombres alternativos incluyen CBP1, CBP2, gp46, AsTP3, PIG14, RA-A47 y SERPINH2, lo que refleja su descubrimiento en diversos contextos celulares y patológicos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación y N-glicosilación, que pueden regular su actividad y estabilidad.
• La expresión de HSP47 se regula al alza bajo condiciones de estrés (por ejemplo, choque térmico) y es crítica para la homeostasis del colágeno en los tejidos conectivos; las mutaciones en SERPINH1 se asocian con osteogénesis imperfecta.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 139–418 de HSP47/SERPINH1 humano (NP_001226.2), expresado como una proteína de fusión recombinante. Esta región cubre una parte sustancial del dominio de serpina, presentando probablemente múltiples epítopos para la generación de anticuerpos policlonales.
• En Western blot (WB), se espera una banda alrededor de 46 kDa en condiciones reductoras y desnaturalizantes. Valide la detección en líneas celulares o tejidos relevantes que expresen colágeno (por ejemplo, fibroblastos, osteoblastos). Utilice controles de carga adecuados.
• Para inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), se requiere permeabilización (por ejemplo, con Triton X-100 o saponina) para acceder al lumen del RE. Espere un patrón de tinción reticular típico de las proteínas del RE. Realice una tinción conjunta con un marcador de RE para confirmación.
• En ELISA, la especificidad y el título del anticuerpo deben optimizarse utilizando HSP47 recombinante o lisados celulares. Como reactivo policlonal, la consistencia entre lotes debe verificarse para ensayos cuantitativos.
• Se confirma la reactividad cruzada con HSP47 de ratón; para otras especies, se debe verificar la homología de secuencia antes de su uso.

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