Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-HSP70/HSPA1A para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P0DMV8/P0DMV9

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de HSP70/HSPA1A

• HSPA1A (Proteína de Choque Térmico de 70 kDa 1A) es un miembro canónico de la familia de chaperonas moleculares HSP70, esencial para la homeostasis de proteínas tanto en condiciones normales como de estrés (UniProt).
• Actúa como una chaperona dependiente de ATP: cicla entre los estados unido a ATP (baja afinidad por el sustrato) y unido a ADP (alta afinidad por el sustrato), facilitando la unión y liberación del sustrato, con las co-chaperonas de dominio J (HSP40s) estimulando la actividad ATPasa y los factores de intercambio de nucleótidos (familia BAG) promoviendo la liberación de ADP. Referencias relacionadas: PMID:24012426 PMID:24318877 PMID:26865365
• Gobierna la clasificación de proteínas: su estado de acetilación dicta si promueve el replegado a través de HOPX o la degradación mediada por ubiquitina a través de STUB1/CHIP, equilibrando así el control de calidad del proteoma. Referencias relacionadas: PMID:27708256
• Se localiza principalmente en el citoplasma y el núcleo, pero también se asocia con el centrosoma durante la mitosis, donde se requiere para la integridad del polo del huso y el ensamblaje del huso bipolar. Referencias relacionadas: PMID:27137183
• Regula vías de señalización clave: mejora la ubiquitinación y degradación mediadas por STUB1 de SMAD3 (inhibiendo la señalización TGF‑β) y FOXP3 (en células T reguladoras durante la inflamación). Referencias relacionadas: PMID:24613385 PMID:23973223
• Participa en la eliminación de factores de transcripción mal plegados, como PRDM1/Blimp‑1, reteniéndolos en el citoplasma y dirigiéndolos a la degradación proteasómica. Referencias relacionadas: PMID:28842558
• Regula negativamente la actividad transcripcional de HSF1 durante la fase de recuperación de la respuesta al choque térmico, contribuyendo a la atenuación de la respuesta al estrés. Referencias relacionadas: PMID:9499401
• Puede ser secretado extracelmente y, en ciertos contextos patológicos, sirve como receptor de la célula huésped para la entrada del rotavirus A. (SWISS-PROT)

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a una secuencia dentro de los aminoácidos 500-600 del HSPA1A humano, una región que es altamente conservada entre humanos, ratones y ratas; por lo tanto, se espera una amplia reactividad cruzada, pero los usuarios deben validar el rendimiento en su sistema de muestra específico.
• Para Western blot, se observa una banda a ~70 kDa; incluya siempre controles positivos (p. ej., lisado de HeLa con choque térmico) y negativos apropiados, y considere usar una proteína de mantenimiento para la normalización.
• Para inmunofluorescencia e inmunohistoquímica, optimice las condiciones de fijación y permeabilización, ya que HSP70 puede estar presente tanto en compartimentos citoplásmicos como nucleares; puede ser necesaria la recuperación de antígeno para secciones de parafina embebidas en formalina.
• Al usar en ELISA, asegúrese de que el tampón de recubrimiento y las condiciones de bloqueo sean compatibles con anticuerpos policlonales para minimizar la unión inespecífica.
• Se ha informado del uso de este anticuerpo en Western blot, inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, inmunohistoquímica (parafina) y ELISA; para otras aplicaciones, puede ser necesaria una mayor optimización.

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