Anticuerpo monoclonal anti-FAP humano para FC - Q12884

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la FAP

• La prolil endopeptidasa FAP (también conocida como seprasa, FAPalpha, DPPIV, SIMP) es una glicoproteína de superficie celular y una serina proteasa que existe como un homodímero de ~170 kDa compuesto por monómeros de ~88 kDa.
• La proteasa muestra actividad endopeptidasa de escisión post-prolina con una marcada preferencia por los motivos Ala/Ser-Gly-Pro-Ser/Asn/Ala, dirigiéndose a sustratos como la alfa-2-antiplasmina (SERPINF2) y SPRY2. Referencias relacionadas: PMID:14751930, PMID:16223769, PMID:16410248
• También posee actividad dipeptidil peptidasa, hidrolizando enlaces prolilo a dos residuos del N-terminal de sustratos sintéticos (p. ej., Ala-Pro, Ile-Pro, Gly-Pro, Arg-Pro, Pro-Pro) y procesando neuropéptidos naturales, incluidos NPY, PYY, sustancia P y BNP. Referencias relacionadas: PMID:10347120, PMID:10593948, PMID:16175601, PMID:21314817
• La FAP degrada la gelatina y el colágeno tipo I desnaturalizado por calor, pero no escinde colágenos nativos ni otros componentes de la MEC como la fibronectina y la laminina. Referencias relacionadas: PMID:10347120, PMID:10455171, PMID:12376466
• En la membrana plasmática, la FAP se asocia con DPP4, PLAUR o integrinas para mediar la proteólisis de la MEC pericelular, promoviendo así la adhesión, migración e invasión celular.
• La FAP está anclada en la superficie celular y enriquecida en protuberancias de membrana (lamelipodios, invadopodios, pliegues); también se encuentra en forma secretada y en el citoplasma.
• La proteína se expresa en fibroblastos estromales activados de diversos tejidos, incluyendo heridas en cicatrización, hígado fibrótico y cánceres epiteliales, así como en células de glioma y melanoma. Está ausente en el hígado normal.
• Dos isoformas (isoforma 1 e isoforma 2) son producidas por corte y empalme alternativo, ambas detectadas en líneas celulares de melanoma, carcinoma y fibroblastos.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para citometría de flujo, titule el anticuerpo para determinar la concentración de tinción óptima e incluya siempre los controles de isotipo adecuados.
• Se sabe que la FAP experimenta escisión proteolítica y glicosilación, lo que puede dar lugar a múltiples bandas (p. ej., ~27 kDa y ~87 kDa) en la inmunodetección. Valide las condiciones de detección utilizando un control positivo relevante (p. ej., líneas celulares que expresan FAP).
• Dado que la FAP es una proteína transmembrana, se pueden considerar protocolos de tinción de células vivas; evite los tampones de permeabilización si se dirige a epítopos extracelulares.
• Confirme que los ajustes del láser y el filtro del citómetro de flujo sean compatibles con (máximos de excitación/emisión ~590/617 nm).

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