Anticuerpo monoclonal anti-Galectina-3 humana para citometría de flujo (intracelular) - P17931

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Galectina-3

• La Galectina-3, codificada por el gen LGALS3, es una proteína multifuncional también conocida como lectina de 35 kDa, proteína de unión a carbohidratos 35 (CBP35), proteína de unión a galactósidos (GALBP), proteína de unión a IgE, L-31, proteína de unión a laminina, lectina L-29 y antígeno Mac-2.
• Funciona como una lectina específica de galactosa que se une a la IgE y media interacciones con integrinas, contribuyendo a la migración de células endoteliales y a la diferenciación de células epiteliales columnares durante la embriogénesis.
• En el núcleo, la galectina-3 actúa como un factor de empalme de ARN pre-mensajero, mientras que en el citoplasma participa en el reconocimiento de endomembranas dañadas y coordina la autofagia reclutando ATG16L1 y BECN1 junto con TRIM16.
• Desempeña funciones críticas en las respuestas inflamatorias agudas, incluida la activación y adhesión de neutrófilos, la quimioatracción de monocitos/macrófagos, la opsonización de neutrófilos apoptóticos y la activación de mastocitos.
• La proteína se mueve entre el citoplasma, el núcleo y el espacio extracelular, siendo secretada a través de una vía no clásica a pesar de carecer de un péptido señal.
• La Galectina-3 sufre modificaciones postraduccionales como acetilación y fosforilación, y contiene enlaces disulfuro, que pueden regular su actividad lectina y estabilidad.
• Se expresa predominantemente en el epitelio del colon, macrófagos activados y membranas fetales, lo que destaca su importancia en la defensa inmunitaria y la remodelación tisular.

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó contra una proteína recombinante que cubre la longitud completa de la galectina-3 humana (aa 1–250); se espera que reconozca tanto los grupos citoplasmáticos como nucleares de la proteína.
• Para citometría de flujo intracelular (FC intra), optimice los protocolos de permeabilización y fijación para garantizar el acceso del anticuerpo a la galectina-3 en varios compartimentos subcelulares.
• Dado que la galectina-3 también puede ser secretada, considere usar inhibidores de secreción o analizar fracciones extracelulares si la proteína de superficie o liberada es de interés; se deben incluir controles apropiados.
• Valide la especificidad de la tinción utilizando líneas celulares con knockout o knockdown de galectina-3, o preincube el anticuerpo con el inmunógeno para confirmar la reducción de la señal.
• La concentración del anticuerpo y los tiempos de incubación pueden requerir titulación para su sistema experimental específico; pruebe un rango de diluciones para lograr una relación señal/ruido óptima.

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