Anticuerpo monoclonal de conejo anti-IgM humana (FC) para WB, IF/ICC, FC y ELISA - P01871

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la región constante mu de la cadena pesada de la inmunoglobulina (cadena pesada de la IgM humana)

• Identidad de la proteína y gen: La región constante mu de la cadena pesada de la inmunoglobulina (cadena pesada de la IgM) está codificada por el gen IGHM. Entre sus nombres alternativos se incluyen región C de la cadena mu de la Ig, BOT, GAL y OU.
• Función de la cadena pesada de la inmunoglobulina: Como región constante de las inmunoglobulinas, desempeña un papel central en la inmunidad humoral, formando receptores unidos a la membrana que desencadenan la activación de las células B y anticuerpos secretados que eliminan los antígenos. La maduración de la afinidad se logra mediante hipermutación somática. Referencias relacionadas: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• Ensamblaje multimérico de la IgM secretada: La región constante de la IgM secretada (sIgM) se multimeriza formando pentámeros y, ocasionalmente, hexámeros, lo que le confiere una elevada avidez para la unión a antígenos polivalentes. Referencias relacionadas: PMID:32029689 PMID:37095205
• Funciones efectoras de la sIgM: La sIgM activa la vía clásica del complemento mediante el reclutamiento de C1q y promueve la fagocitosis de células apoptóticas y patógenos mediante interacciones con receptores Fc y la lectina de unión a manosa. Referencias relacionadas: PMID:12847249 PMID:19006321 PMID:28230186
• IgM unida a la membrana en el complejo BCR: La forma unida a la membrana constituye el receptor de células B (BCR), transmite señales tónicas para la supervivencia de las células B y media la selección del pre-BCR y la exclusión alélica.
• Localización subcelular: La IgM se encuentra tanto secretada en los fluidos extracelulares como anclada a la membrana celular, en consonancia con su doble función como efector humoral y receptor de superficie.
• Características estructurales y postraduccionales: La proteína contiene dominios de inmunoglobulina, experimenta glicosilación y formación de enlaces disulfuro, y es objeto de corte y empalme alternativo. Se dispone de secuenciación directa de la proteína y de estructuras tridimensionales.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la región Fc (aa 218–453), común a todas las isoformas de la IgM humana; por tanto, se espera que el anticuerpo reaccione tanto con la IgM secretada como con la unida a la membrana.
• En Western blot en condiciones reductoras, la cadena pesada de la IgM migra aproximadamente a 75 kDa debido a la glicosilación, aunque el peso no modificado previsto es de 49 kDa. Valide el desplazamiento de la banda en su lisado.
• En inmunofluorescencia/ICC, la IgM de superficie puede detectarse en células B vivas; la permeabilización puede revelar depósitos intracelulares. Optimice la fijación y la permeabilización para su tipo celular.
• Citometría de flujo: este anticuerpo es adecuado para teñir la IgM de superficie de las células B. Titule el anticuerpo e incluya controles de isotipo apropiados.
• ELISA: utilice este anticuerpo como reactivo de detección para la IgM humana en inmunoensayos tipo sándwich. Debe comprobarse la reactividad cruzada con otras especies si se amplía el análisis a muestras no humanas.
• Valide siempre el anticuerpo en el sistema de muestras pertinente y bajo sus condiciones experimentales específicas.

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