Anticuerpo Policlonal Anti-HuR/ELAVL1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15717

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de HuR/ELAVL1

• HuR/ELAVL1 es una proteína de unión a ARN que reconoce específicamente elementos ricos en AU (ARE) y motivos poli-U en las regiones 3'-UTR de los ARNms, como FOS e IL3, estabilizándolos y mejorando su traducción. Se une preferentemente a la secuencia 5'-UUUU[AG]UUU-3'. Referencias relacionadas: PMID:14517288, PMID:18285462, PMID:31358969, PMID:14731398, PMID:17632515, PMID:8626503
• Durante la diferenciación de células madre embrionarias, HuR se une preferentemente a ARNms no metilados con m6A, estabilizándolos para promover el programa de diferenciación (Por similitud).
• HuR también se une al ARNm de MYC modificado con m6A, contribuyendo a la estabilidad del oncogén MYC y a la capacidad proliferativa (PubMed:32245947). Referencias relacionadas: PMID:32245947
• Aumenta la estabilidad del ARNm de leptina mediante la unión a ARE, vinculándolo con el metabolismo energético (PubMed:29180010). Referencias relacionadas: PMID:29180010
• HuR se desplaza entre el núcleo y el citoplasma, y se localiza en los gránulos de estrés y los cuerpos P en respuesta al estrés celular.
• Se expresa de forma ubicua; HuR se detecta en el cerebro, hígado, timo y músculo.
• Las modificaciones postraduccionales, incluidas la fosforilación, acetilación y metilación, regulan la función y la distribución subcelular de HuR.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para WB, use lisados de células enteras de líneas celulares humanas o de ratón que expresen HuR (p. ej., HeLa, HEK293). El tamaño de banda esperado es de aproximadamente 36 kDa. Considere la preabsorción con el péptido inmunizante para confirmar la especificidad.
• Para IHC-P, valide las condiciones de recuperación de antígeno ( tampón de citrato o EDTA) en secciones de tejido humano o de ratón que se sepa que expresan HuR, como el cerebro o el hígado. Se recomienda un paso de bloqueo para reducir el fondo.
• Para IF/ICC, optimice los protocolos de fijación (p. ej., 4% PFA) y permeabilización (p. ej., 0,1% Triton X-100). El desplazamiento nucleo-citoplasmático de HuR puede verse afectado por el tratamiento celular; incluya controles no tratados.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse tanto en formato directo como tipo sándwich. Emparéjelo con un anticuerpo de detección que reconozca un epítopo distante para una sensibilidad óptima.
• Dado que HuR está sujeto a modificaciones postraduccionales, considere el contexto biológico al interpretar los resultados; las formas modificadas pueden migrar de manera diferente en SDS-PAGE.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

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