Anticuerpo monoclonal de conejo anti-ICAM-1/CD54 para WB, IHC-P, FC, ELISA - Q00238

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de ICAM-1/CD54

• ICAM-1 (CD54) es una glicoproteína transmembranal perteneciente a la superfamilia de las inmunoglobulinas, que funciona como molécula de adhesión celular.
• Actúa como ligando de las integrinas LFA-1 (ITGAL:ITGB2) y MAC-1 (ITGAM:ITGB2), mediando la adhesión entre leucocitos y células endoteliales y la migración transendotelial.
• Durante la extravasación de leucocitos, la unión de ICAM-1 estimula la formación de copas apicales endoteliales a través de la activación de ARHGEF26/SGEF y RHOG.
• En células epiteliales, la interacción de ICAM-1 con MUC1 promueve la agregación celular.
• ICAM-1 se localiza en la membrana celular y presenta múltiples dominios similares a inmunoglobulinas, un péptido señal y una hélice transmembranal.
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales que incluyen glicosilación N-ligada, formación de enlaces disulfuro y ubiquitinación, que pueden regular su estabilidad y función.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región extracelular (aa 28-493) de ICAM-1 de rata, que incluye múltiples dominios similares a Ig, lo que sugiere que el anticuerpo puede reconocer la conformación extracelular nativa; tenga esto en cuenta para aplicaciones que requieren el reconocimiento de la estructura nativa (por ejemplo, FC, ELISA).
• Para Western blotting (WB), el peso molecular previsto es de ~60 kDa; verifique la especificidad de la banda usando lisados adecuados y controles de carga.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), optimice los métodos de recuperación de antígeno, ya que ICAM-1 es una proteína de membrana; valide la tinción en tejidos de rata relevantes que se sabe que expresan ICAM-1 (por ejemplo, endotelio, tejidos inflamados).
• Para citometría de flujo (FC), utilice tinción indirecta con anticuerpos secundarios adecuados; confirme la reactividad con líneas celulares de rata o células primarias.
• Las aplicaciones de ELISA pueden beneficiarse de la titulación de los anticuerpos de captura y detección para alcanzar relaciones óptimas señal-ruido.
• Se informa reactividad cruzada para rata; al usar otras especies, valide mediante alineación de secuencias y experimentos piloto.

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