Anticuerpo Policlonal Anti-IDH1 para WB, IF/ICC, ELISA - O75874

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de IDH1

• IDH1 codifica la isocitrato deshidrogenasa citoplásmica [NADP] (IDPc), que cataliza la descarboxilación oxidativa dependiente de NADP+ del isocitrato a 2-oxoglutarato, una reacción requerida por enzimas posteriores como la fitanoil-CoA dioxigenasa. Referencias relacionadas: PMID:10521434 PMID:19935646
• La enzima genera NADPH, un cofactor crítico para numerosas vías de biosíntesis y defensa antioxidante, lo que lo vincula al anabolismo celular y la homeostasis redox.
• IDH1 se localiza predominantemente en el citosol y los peroxisomas, y también puede actuar como cristalina epitelial corneal para mantener la transparencia corneal (por similitud).
• Se trata de una enzima dependiente de metales que requiere magnesio o manganeso para su actividad, y está sujeta a acetilación y fosforilación según lo revelado por estudios proteómicos.
• Como componente clave del ciclo de los ácidos tricarboxílicos y la vía del glioxilato, IDH1 participa en el metabolismo central del carbono, y se encuentran mutaciones somáticas comúnmente en gliomas y leucemia mieloide aguda.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a una región entre los aminoácidos 100–200, que está conservada en humano, ratón, rata y mono; esto respalda la amplia reactividad cruzada entre especies reportada para transferencia western (WB) e inmunofluorescencia (IF/ICC).
• Para WB, se espera una banda alrededor de 47 kDa; considere usar condiciones reductoras y controles de carga en lisados de líneas celulares que expresan IDH1 (por ejemplo, HeLa, HepG2).
• En IF/ICC, valide los patrones de localización con marcadores de organelos para confirmar la tinción citosólica y peroxisomal, como se indica en la literatura.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir la optimización del antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo; se puede usar un ELISA directo o sándwich con proteína IDH1 recombinante como control positivo.
• Tenga en cuenta que el anticuerpo es policlonal y puede presentar variabilidad entre lotes; debe verificarse un rendimiento consistente en el sistema experimental correspondiente.

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