Anticuerpo Policlonico de Conejo Anti-IHH para WB y ELISA - Q14623

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de IHH

• IHH (proteína Indian hedgehog) es un miembro de la familia hedgehog, codificado por el gen IHH. El precursor de longitud completa sufre escisión autofítica y modificación por colesterol para generar el morfógeno activo N-terminal.
• El producto N-terminal de IHH activa la vía de señalización de smoothened al unirse a los receptores patched (PTCH1/2), aliviando la inhibición de SMO, lo que es esencial para el desarrollo de hueso y cartílago.
• IHH regula positivamente la expresión de PTHLH para evitar la hipertrofia condrocitaria durante la formación ósea endocondral, y promueve independientemente la proliferación de condrocitos.
• IHH participa en la señalización paracrina de hedgehog (PMID:24342078) y, cuando se asocia con partículas de VLDL, actúa como un morfógeno circulante para mantener la integridad de las células endoteliales (PMID:20839884). Referencias relacionadas: PMID:24342078 PMID:20839884
• Más allá del desarrollo esquelético, IHH participa en el desarrollo del epitelio pigmentario retiniano, los fotorreceptores y los tejidos perioculares.
• Subcelularmente, la proteína se localiza en las membranas del retículo endoplásmico y el aparato de Golgi; el producto N-terminal secretado puede asociarse con la membrana celular.
• Se observa expresión tisular en el pulmón embrionario, y en el riñón e hígado adultos.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen la escisión autocatalítica, la unión de colesterol y la palmitoilación; la proteína se clasifica como glicoproteína y lipoproteína.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 202–411 de la IHH humana, cubriendo una región distal al sitio de escisión autocatalítica. La proteína de longitud completa tiene un peso molecular predicho de 45 kDa, pero tenga en cuenta que la IHH endógena puede procesarse, lo que da lugar a bandas adicionales en WB.
• Para Western blot, valide la especificidad del anticuerpo utilizando controles positivos adecuados (por ejemplo, tejidos o células que se sabe que expresan IHH) y considere utilizar un control de carga. Optimice las condiciones de bloqueo y detección de forma empírica.
• Este anticuerpo policlonal reacciona con IHH de humano, ratón y rata, por lo que es adecuado para estudios entre especies. Sin embargo, confirme la reactividad en la especie objetivo si no ha sido validada previamente.
• Para ELISA, la titulación del anticuerpo y las concentraciones óptimas del antígeno de recubrimiento deben determinarse experimentalmente.
• Al igual que con cualquier reactivo policlonal, puede producirse variabilidad entre lotes; considere reservar un patrón de calibración para obtener resultados consistentes.

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