Anticuerpo policlonal de conejo anti-Ikaros para WB - Q13422

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de Ikaros

• La proteína de unión al ADN Ikaros (IKZF1) es un factor de transcripción con dedos de zinc perteneciente a la familia Ikaros, codificado por el gen IKZF1 (también conocido como LYF1, ZNFN1A1). Es un regulador clave de la diferenciación de las células hematopoyéticas (PubMed:17934067). Referencias relacionadas: PMID:17934067
• Ikaros se une al ADN de los satélites gamma, contribuyendo a la regulación de la estructura de la cromatina y la expresión génica (PubMed:17135265, PubMed:19141594). Referencias relacionadas: PMID:17135265 | PMID:19141594
• Desempeña un papel fundamental en el desarrollo de los linfocitos, incluidos los linfocitos B y T, al unirse al potenciador del gen CD3-delta y activarlo, y al reprimir el gen TdT durante la diferenciación de los timocitos.
• Mediante su asociación con complejos dependientes e independientes de HDAC, Ikaros regula la transcripción y dirige los complejos de remodelación de la cromatina NuRD y BAF (SWI/SNF) al locus de la beta-globina en los eritrocitos adultos a través del complejo PYR.
• Ikaros aumenta la apoptosis normal en las células eritroides adultas y confiere competencia temporal temprana a las células progenitoras de la retina (RPC) (por similitud).
• La función de Ikaros es específica de la isoforma y está modulada por isoformas inactivas con efecto negativo dominante (PubMed:17135265, PubMed:17934067). Referencias relacionadas: PMID:17135265 | PMID:17934067
• La localización subcelular es principalmente nuclear, aunque también puede encontrarse en el citoplasma. La expresión tisular es abundante en el timo, el bazo, los leucocitos de sangre periférica y los ganglios linfáticos, con niveles más bajos en la médula ósea y el intestino delgado.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación y la formación de enlaces isopeptídicos; la proteína contiene múltiples dedos de zinc de tipo C2H2 esenciales para la unión al ADN.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1-270) de Ikaros humano e incluye dominios funcionales clave; este diseño puede permitir el reconocimiento de múltiples isoformas que comparten esta secuencia. Valide la especificidad en su sistema experimental utilizando controles adecuados, como muestras con silenciamiento o eliminación de Ikaros.
• Para Western blot (WB), considere utilizar extractos nucleares de tejidos o líneas celulares linfoides (por ejemplo, timo, bazo, Jurkat), dada la abundante expresión de Ikaros en estas muestras. Se espera una banda de aproximadamente 58 kDa para la proteína de longitud completa.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), Ikaros presenta una tinción predominantemente nuclear; asegúrese de realizar una permeabilización adecuada y considere la contratinción con un marcador nuclear.
• Para la inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), verifique que el anticuerpo pueda inmunoprecipitar eficazmente los loci genómicos unidos a Ikaros. Optimice las condiciones de entrecruzamiento y sonicación para su tipo celular.
• Se ha informado que este anticuerpo presenta reactividad cruzada con Ikaros de ratón y rata; sin embargo, se recomienda realizar una alineación de la secuencia del péptido inmunógeno entre especies para confirmar su idoneidad para estos modelos.

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