Anticuerpo policlonal de conejo anti-IKKγ para WB, IP, ELISA - Q9Y6K9

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de IKKγ

• IKKγ, también conocida como NEMO o IKBKG, es la subunidad reguladora del complejo canónico de la quinasa IκB (IKK), esencial para la señalización de NF-κB. Actúa como una estructura de soporte que coordina las subunidades quinasas IKKα e IKKβ.
• La función principal de IKKγ es facilitar la fosforilación y la posterior degradación dependiente de ubiquitina de los inhibidores de NF-κB (IκB), liberando así NF-κB para su translocación nuclear y la activación de genes diana (PubMed:14695475, PubMed:20724660, PubMed:21518757). Referencias relacionadas: PMID:14695475 PMID:20724660 PMID:21518757
• Reconoce y se une específicamente a cadenas de poliubiquitina, mostrando una gran afinidad por la ubiquitina lineal (unida mediante M1) y unida mediante Lys-63. Esta capacidad de detección de ubiquitina es fundamental para la activación de IKK en las vías posteriores a TNF, IL-1 y los receptores tipo Toll (PubMed:16547522, PubMed:18287044, PubMed:19033441). Referencias relacionadas: PMID:16547522 PMID:18287044 PMID:19033441
• IKKγ se desplaza entre el citoplasma y el núcleo, contribuyendo a las respuestas al daño del ADN y a la regulación transcripcional.
• La proteína participa en la inmunidad innata antiviral: es esencial para la activación de IRF3 tras una infección viral (PubMed:19854139) y media las vías TLR3/IFIH1 mediante poliubiquitinación unida a Lys-27 (PubMed:20724660). Referencias relacionadas: PMID:19854139 PMID:20724660
• IKKγ se expresa ampliamente en tejidos humanos, incluidos el corazón, el cerebro, la placenta, los pulmones, el hígado, el músculo esquelético, los riñones y el páncreas.
• Las mutaciones en el gen IKBKG están relacionadas con varios trastornos genéticos, como la incontinencia pigmentaria, la displasia ectodérmica anhidrótica con inmunodeficiencia y la osteopetrosis.
• La proteína contiene un dominio de hélice enrollada y un dedo de zinc C-terminal que media las interacciones proteína-proteína y la unión a ubiquitina.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es una proteína recombinante que cubre casi toda la longitud de la IKKγ humana (aa 1-419). Como anticuerpo policlonal de conejo, puede reconocer múltiples epítopos y detectar diversas isoformas o formas del objetivo modificadas postraduccionalmente.
• En Western blot pueden observarse múltiples bandas (pesos moleculares previstos de 37, 48 y 56 kDa), que posiblemente representan variantes de corte y empalme o especies proteicas modificadas. Valide la detección y la intensidad relativa de las bandas utilizando lisados de control positivos y negativos adecuados de líneas celulares humanas o de ratón.
• En la inmunoprecipitación, deben optimizarse los pasos de preaclaramiento y las condiciones adecuadas del tampón de lisis, ya que IKKγ existe en un complejo multiproteico de gran tamaño.
• Para aplicaciones de ELISA, considere utilizar un par de anticuerpos compatibles para la captura y la detección, y verifique la sensibilidad con IKKγ recombinante o muestras positivas conocidas.
• Debido a su alta reactividad cruzada con el ratón, este anticuerpo es adecuado para estudios en modelos murinos, pero debe validarse en el tejido o tipo celular específico de interés.

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