Anticuerpo Monoclonal Anti-IL-31 para WB, IF/ICC, ELISA - Q6EBC2

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de IL-31

• La interleucina-31 (IL-31) es una citocina secretada que transduce señales a través de un complejo receptor heterodimérico compuesto por el receptor de oncostatina M (OSMR) y el receptor A de IL-31 (IL31RA) (PubMed:15184896, PubMed:15627637). Referencias relacionadas: PMID:15184896 PMID:15627637
• Tras la unión al ligando, IL31RA forma heterodímeros con OSMR, lo que conduce a la activación de las quinasas Janus JAK1 y JAK2, que fosforilan residuos de tirosina en las subunidades del receptor, creando sitios de unión para los factores de transcripción STAT1, STAT3 y STAT5B (PubMed:15184896, PubMed:15627637). Referencias relacionadas: PMID:15184896 PMID:15627637
• La señalización de IL-31 también activa la vía MAPK (ERK1/2) mediante el reclutamiento de la proteína adaptadora SHC1 (PubMed:15627637). Referencias relacionadas: PMID:15627637
• Desempeña un papel fundamental en la inmunidad cutánea, con implicaciones en enfermedades inflamatorias de la piel (PubMed:15184896). Referencias relacionadas: PMID:15184896
• Aumenta la supervivencia de las células progenitoras mieloides in vitro e induce la expresión de alfa similar a resistina (RETNLA) y la proteína amiloide sérica en macrófagos (Por similitud).
• Su localización subcelular es principalmente secretada, lo que coincide con su función de citocina.
• Se detecta en niveles bajos en varios tejidos, entre ellos testículo, médula ósea, músculo esquelético, riñón, colon, timo, intestino delgado y tráquea.
• Contiene un péptido señal y está N-glicosilado; la proteína madura predicha tiene un peso molecular de aproximadamente 18,2 kDa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno comprende los aminoácidos 24-164 de IL-31 humana, correspondientes a la proteína secretada madura. Este proteína recombinante se utilizó como inmunógeno, por lo que el anticuerpo detecta la forma nativa procesada; considere el uso de condiciones desnaturalizantes para Western blot para garantizar un desenrollamiento completo, pero verifique el rendimiento en condiciones nativas para IF/ICC.
• Para Western blot, se espera una proteína de aproximadamente 18 kDa. Utilice un gel de SDS-PAGE al 12-15% para una resolución óptima de proteínas de bajo peso molecular y transfiera a una membrana de PVDF o nitrocelulosa con un tamaño de poro de 0,2 µm.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, dado que IL-31 es secretada, incluya un inhibidor del transporte de proteínas (por ejemplo, brefeldina A) en el medio de cultivo antes de la fijación para atrapar la proteína intracelular. Valide el patrón de tinción con controles positivos y negativos adecuados.
• Para ELISA, el anticuerpo monoclonal se puede evaluar como reactivo de captura o detección en formato sándwich, emparejado con otro clon o un anticuerpo policlonal. Pruebe las concentraciones de recubrimiento y las condiciones de amortiguación óptimas de forma empírica.
• Aunque está validado para humanos, no se ha reportado reactividad cruzada con otras especies; pruebe la reactividad en su sistema modelo si utiliza muestras no humanas.

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