Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-IL1β para WB, IF/ICC, ELISA - P10749

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de IL1β

• La interleucina-1 beta (IL1β) es una potente citoquina proinflamatoria perteneciente a la familia de la interleucina-1, codificada por el gen Il1b en ratones (ID de Gen: 16176, UniProt P10749). La proteína se sintetiza como un precursor de 31 kDa que se escinde para generar una forma madura secretada.
• La IL1β se identificó inicialmente como el principal pirógeno endógeno, capaz de inducir fiebre. Estimula la síntesis de prostaglandinas, promueve la afluencia y activación de neutrófilos, y regula las funciones de las células T y B, impulsando las respuestas inmunitarias adaptativas.
• La IL1β desempeña un papel central en la cascada inflamatoria: sinergiza con IL12 para inducir la producción de interferón-gamma (IFNG) por parte de las células Th1 y promueve la diferenciación de Th17. También facilita la angiogénesis al inducir la producción de VEGF en combinación con TNF e IL6.
• La forma madura de IL1β se libera extracelularmente a través de una vía de secreción no clásica. Tras la activación del inflamasoma y la piroptosis, la IL1β madura sale pasivamente a través de los poros de gasdermina-D (GSDMD) en la membrana plasmática, vinculando la detección inmunitaria innata con la inflamación.
• A nivel subcelular, IL1β se encuentra en el citosol y los lisosomas, y se secreta activamente. También se asocia con exosomas extracelulares, lo que indica múltiples rutas de secreción (UniProt: SUBCELLULAR LOCATION).
• La expresión de IL1β está estrictamente regulada y se observa predominantemente en macrófagos activados a nivel proteico, lo cual es consistente con su función en la inmunidad innata (UniProt: TISSUE SPECIFICITY).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 118-269 del precursor de IL1β de ratón (NP_032387.1), cubriendo la región de IL1β madura. El anticuerpo puede reconocer tanto el precursor de ~31 kDa como la forma madura de ~17 kDa dependiendo de la muestra y el estado de activación. Se recomienda ejecutar marcadores de peso molecular apropiados y controles positivos (p. ej., lisados de macrófagos estimulados con LPS) para identificar las bandas específicas.
• Para Western blot (WB), utilice SDS-PAGE reductor y protocolos de transferencia estándar. Se espera una banda alrededor de 31 kDa para el precursor de longitud completa, mientras que una banda a ~17 kDa puede aparecer en muestras secretadas o escindidas.
• En inmunofluorescencia/ICC (IF/ICC), incluya controles de estimulación (p. ej., LPS ± ATP) para inducir la expresión y secreción de IL1β, ya que los niveles basales pueden ser bajos. La tinción simultánea con marcadores de orgánulos puede ayudar a visualizar su localización citosólica o secretada.
• Para ELISA, considere emparejar este anticuerpo con un anticuerpo de detección adecuado que reconozca un epítopo distinto si se utiliza como reactivo de captura. Valide el ensayo con estándares de IL1β de ratón recombinante y muestras biológicas.
• La reactividad cruzada está confirmada para ratón; realice una validación específica de la especie si se utiliza en otras especies. La IgG endógena de ratón puede producir fondo en tejidos de ratón; el uso de anticuerpos secundarios anti-conejo y un bloqueo apropiado puede mitigar esto.

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