Anticuerpo policlonal de conejo anti-iNOS para WB y ELISA - P35228

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de iNOS

• La óxido nítrico sintasa inducible (iNOS), también conocida como NOS2A, HEP-NOS o NOS tipo II, es una enzima dependiente de calcio/calmodulina que cataliza la producción de óxido nítrico (NO) a partir de L-arginina, con diversas funciones de señalización. Referencias relacionadas: PMID:7504305, PMID:7531687, PMID:7544004
• En macrófagos, el NO derivado de iNOS media las acciones tumoricidas y bactericidas, y la enzima también presenta actividad nitrosilasa, catalizando la S-nitrosilación de cisteína en dianas citoplasmáticas como PTGS2/COX2. Referencias relacionadas: PMID:25417112
• Como parte del complejo transnitrosilasa iNOS-S100A8/9, iNOS facilita la S-nitrosilación dependiente de estímulo de GAPDH en 'Cys-247', influyendo en la actividad del complejo GAIT y modulando dianas como ANXA5, EZR, MSN y VIM. Referencias relacionadas: PMID:25417112
• iNOS participa en la inflamación, potenciando la síntesis de mediadores proinflamatorios como IL6 e IL8. Referencias relacionadas: PMID:19688109
• A nivel subcelular, iNOS se localiza en el citoplasma y el citosol, lo que coincide con su función enzimática.
• Se ha descrito su expresión tisular en hígado, retina, células óseas, células epiteliales de las vías aéreas pulmonares y condrocitos; no se expresa en plaquetas. Referencias relacionadas: PMID:7504305
• iNOS pertenece a la familia NOS y contiene múltiples dominios de unión a cofactores, incluyendo FAD, FMN, hemo y NADP, con sitios reguladores de unión a calcio/calmodulina y de fosforilación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 974–1143 de iNOS humano (NP_000616.3), una región C-terminal; este anticuerpo policlonal puede reconocer tanto formas de longitud completa como truncadas, pero se recomienda su validación en el sistema de muestra objetivo.
• Para Western blot, se espera una banda de alrededor de 131 kDa; los controles positivos pueden incluir lisados de células de macrófago RAW 264.7 (ratón) o THP-1 (humano) estimuladas con IFN-γ/LPS.
• Se ha descrito reactividad cruzada con iNOS de ratón; para otras especies, realice pruebas en modelos adecuados antes de su uso rutinario.
• En ELISA, el anticuerpo se puede usar para detección o captura; se recomienda optimizar la concentración de recubrimiento y las condiciones de bloqueo para obtener la mejor relación señal-ruido.

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