Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la enzima degradante de insulina (IDE)

• La enzima degradante de insulina (IDE), también conocida como insulisina, proteasa insulínica o proteasa degradante de Abeta, es una metaloproteasa de zinc muy conservada que participa en la eliminación de múltiples hormonas peptídicas y moléculas de señalización.
• El IDE media la degradación celular de la insulina, el glucagón y el polipéptido amiloide de los islotes (IAPP), desempeñando un papel crítico en la regulación de la homeostasis de la glucosa en sangre. Referencias relacionadas: PMID:10684867 PMID:17051221 PMID:17613531
• El IDE degrada los péptidos beta-amiloide (Abeta) derivados de la proteína precursora de amiloide (APP), contribuyendo a la eliminación de agregados neurotóxicos asociados con la enfermedad de Alzheimer. Referencias relacionadas: PMID:26394692 PMID:9830016
• Inactiva los péptidos natriuréticos (ANP, BNP, CNP) al escindirlos, atenuando así la señalización mediada por cGMP; el IDE también procesa una forma con desplazamiento de marco de lectura asociada a enfermedades de NPPA vinculada a la fibrilación auricular familiar. Referencias relacionadas: PMID:21098034
• La unión del sustrato induce grandes cambios conformacionales en el IDE, permitiendo que la enzima acomode y degrade sustratos más grandes como la insulina. Referencias relacionadas: PMID:23922390 PMID:26394692 PMID:29596046
• El IDE participa en el procesamiento de antígenos, generando los extremos N y C del péptido derivado de MAGEA3 presentado por moléculas de clase I del MHC.
• La enzima se localiza principalmente en el citosol, pero también se encuentra en la membrana celular y es secretada; en el cerebro se detecta en neuronas y líquido cefalorraquídeo.
• El IDE actúa como una enzima alostérica con capacidad de unión a ATP y funciona como un receptor de la célula huésped para la entrada del virus de la varicela-zóster.

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo monoclonal de conejo se genera contra un péptido sintético correspondiente a la región N-terminal (aminoácidos 1-100) del IDE humano; este epítopo es muy conservado entre humanos, ratones y ratas, lo que coincide con la reactividad cruzada informada.
• Para el análisis de Western blot (WB), debido al peso molecular relativamente alto del IDE (~118 kDa), considere el uso de un gel SDS-PAGE con bajo porcentaje de poliacrilamida y tiempos de transferencia extendidos para garantizar una separación efectiva de las proteínas y su transferencia a la membrana.
• En aplicaciones de ELISA, valide el rendimiento del anticuerpo tanto en condiciones nativas como desnaturalizantes para confirmar la especificidad hacia el epítopo objetivo y optimizar las relaciones señal-ruido.
• Dado que el IDE se expresa en múltiples tejidos pero es particularmente abundante en el cerebro y puede ser secretado, puede ser necesaria una preparación adecuada de la muestra (por ejemplo, concentración de líquido cefalorraquídeo) al analizar fluidos fisiológicos o sobrenadantes celulares.

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