Anticuerpo Policlonal Anti-IRAK1 para WB, IF/ICC, ELISA - P51617

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de IRAK1

• IRAK1 (quinasa 1 asociada al receptor de interleucina-1) es una quinasa serina/treonina esencial para iniciar las respuestas inmunes innatas, actuando como un mediador clave en las vías de señalización del receptor tipo Toll (TLR) y del receptor de IL-1.
• Tras la activación de TLR/IL-1R, IRAK1 es reclutada rápidamente por MYD88, fosforilada por IRAK4 y sufre autofosforilación, lo que desencadena eventos de señalización posteriores.
• IRAK1 fosforila las ligasas de ubiquitina E3 Pellino (PELI1, PELI2, PELI3), promoviendo la poliubiquitinación de la propia IRAK1, lo que conduce al reclutamiento del complejo IKK y la posterior translocación nuclear de NF-kB.
• También fosforila TIRAP para promover su ubiquitinación y degradación, y fosforila directamente IRF7 para impulsar la producción de interferón tipo I, estableciendo un estado antiviral.
• La localización subcelular incluye citoplasma, núcleo y gotas lipídicas; la sumoilación de IRAK1 facilita su translocación nuclear donde fosforila STAT3.
• Existen dos isoformas principales: la isoforma 1 se expresa más fuertemente que la isoforma 2, ambas están presentes de forma ubicua en tejidos humanos.
• IRAK1 está involucrada en interacciones huésped-virus y sufre diversas modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, ubiquitinación y sumoilación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 424-633 de IRAK1 humano, una región conservada entre humano, ratón y rata, lo que respalda la reactividad cruzada observada.
• Para Western blot, considere usar lisados celulares totales de células inmunes estimuladas con TLR/IL-1R (por ejemplo, THP-1, RAW264.7) para detectar bandas dependientes de activación cerca de 77 kDa; la expresión basal puede variar.
• En experimentos de IF/ICC, optimice las condiciones de fijación y permeabilización; IRAK1 endógena puede localizarse tanto en el citoplasma como en el núcleo dependiendo del tipo celular y la estimulación.
• Para ELISA, el emparejamiento con un anticuerpo de detección coincidente (por ejemplo, contra un epítopo diferente) puede mejorar la sensibilidad; valide en la matriz de muestra relevante.
• Al ser un anticuerpo policlonal, es posible una variabilidad entre lotes; incluya controles positivos (por ejemplo, células estimuladas) y negativos en cada ensayo.

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