Anticuerpo Policlonal Anti-IRAK4 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9NWZ3

Especificaciones y Parámetros Centrales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de IRAK4

• IRAK4 (quinasa 4 asociada al receptor de interleucina-1) es una serina/treonina quinasa esencial para la señalización de la inmunidad innata, codificada por el gen IRAK4 en humanos. También se conoce como antígeno de carcinoma renal NY-REN-64.
• Tras la activación de los receptores tipo Toll (TLR) o el receptor de interleucina-1 (IL-1R), MYD88 recluta a IRAK4 para formar el complejo Myddosoma junto con IRAK2, iniciando la transducción de señal downstream. Referencias relacionadas: PMID:17878374
• IRAK4 fosforila a IRAK1, que luego sufre autofosforilación y forma un complejo con TRAF6 y TAK1; también fosforila a las proteínas Pellino (PELI1, PELI2, PELI3) para promover la poliubiquitinación de IRAK1, conduciendo finalmente a la translocación nuclear de NF-κB y la activación de la expresión de genes inflamatorios.
• Alternativamente, IRAK4 fosforila a TIRAP para promover su ubiquitinación y degradación, y fosforila a NCF1 para regular la activación de la NADPH oxidasa después de la estimulación con LPS, lo que sugiere un papel en las respuestas microbicidas.
• A nivel subcelular, IRAK4 se localiza principalmente en el citoplasma, lo que coincide con su función en el ensamblaje del signalosoma en sitios proximales a la membrana.
• Las palabras clave asociadas a IRAK4 incluyen quinasa, unión a nucleótidos, magnesio, acetilación, splicing alternativo y variantes patogénicas; las mutaciones en IRAK4 están vinculadas a trastornos de inmunodeficiencia primaria como IPD1 e IMD67, caracterizados por una mayor susceptibilidad a infecciones bacterianas piógenas.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se generó contra un fragmento N-terminal (aa 1-200) que cubre el dominio de muerte de IRAK4 humana; puede reconocer tanto las isoformas de longitud completa como las isoformas truncadas en el extremo N, si estas están presentes.
• Para Western blotting, se espera una banda de aproximadamente 52 kDa en lisados de líneas celulares humanas, de ratón o de rata; el peso molecular puede variar ligeramente debido a la fosforilación o las condiciones del gel.
• En inmunofluorescencia/ICC, se debe observar una localización citoplasmática; utilice protocolos adecuados de fijación y permeabilización.
• Para ELISA, considere la titulación del anticuerpo y optimice la concentración del antígeno de recubrimiento para obtener la mejor relación señal-ruido.
• El proveedor indica la reactividad cruzada con IRAK4 de ratón y rata; se recomienda la validación en los sistemas de muestra específicos antes de realizar estudios a gran escala.
• Para estudiar la activación de IRAK4, estimule las células con IL-1β o ligandos de TLR (por ejemplo, LPS) y evalúe el estado de fosforilación o la formación de complejos mediante coinmunoprecipitación.

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