Anticuerpo policlonal anti-IRF3 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - Q14653

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de IRF3

• IRF3 es un regulador transcripcional clave de las respuestas inmunitarias dependientes del interferón de tipo I (IFN), y desempeña un papel fundamental en la inmunidad innata contra virus de ADN y ARN. Referencias relacionadas: PMID:22394562, PMID:24049179, PMID:25636800
• Regula la transcripción de los genes del IFN de tipo I (IFN-alfa e IFN-beta) y de los genes estimulados por IFN (ISG) mediante su unión a un elemento de respuesta estimulado por interferón (ISRE) en sus promotores. Referencias relacionadas: PMID:11846977, PMID:16846591, PMID:16979567
• IRF3 es un activador más potente del gen del IFN-beta (IFNB) que del gen del IFN-alfa (IFNA) y desempeña un papel fundamental tanto en las fases tempranas como en las tardías de la inducción de los genes IFNA/B. Referencias relacionadas: PMID:16846591, PMID:16979567, PMID:20049431
• Se encuentra en forma inactiva en el citoplasma de las células no infectadas; tras una infección viral, la presencia de ARN bicatenario (dsRNA) o la señalización del receptor tipo Toll (TLR), es fosforilado por las quinasas IKBKE y TBK1, lo que induce un cambio conformacional que conduce a la dimerización y a su localización nuclear. Referencias relacionadas: PMID:22394562, PMID:25636800, PMID:27302953
• En el núcleo, IRF3 se asocia con la proteína de unión a CREB (CREBBP) para formar el factor 1 activado por dsRNA (DRAF1), un complejo que activa la transcripción de los genes del IFN de tipo I y de los ISG. Referencias relacionadas: PMID:16154084, PMID:27302953, PMID:33440148
• En respuesta a la infección por el virus Sendai, IRF3 es reclutado en la mitocondria y forma el complejo apoptótico TOMM70:HSP90AA1:IRF3:BAX, induciendo la apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:25609812
• Se expresa constitutivamente en diversos tejidos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación (crítica para la activación), acetilación y ubiquitinación; el corte y empalme alternativo genera isoformas adicionales.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 100–200 del IRF3 humano (NP_001184051.1), una región situada dentro del dominio de unión al ADN del extremo N-terminal; considere utilizar esta región para el mapeo de epítopos o experimentos de bloqueo.
• En el Western blot, se espera una banda de aproximadamente 47 kDa; valide en líneas celulares relevantes infectadas por virus o estimuladas con IFN para confirmar la expresión.
• Se ha informado reactividad cruzada con el IRF3 de ratón y rata; verifique la homología de secuencia en la región del inmunógeno si utiliza estas especies.
• Para aplicaciones de ChIP, optimice las condiciones de entrecruzamiento y sonicación debido al transporte nucleocitoplasmático dinámico de IRF3.
• Para IF/ICC, utilice métodos adecuados de fijación y permeabilización para detectar tanto la localización citoplasmática como la nuclear.

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