Anticuerpo policlonal de conejo anti-Irf3 para WB, IHC-P, ELISA - P70671

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Irf3

• El factor regulador de interferón 3 (Irf3) es un regulador transcripcional clave de las respuestas inmunitarias innatas dependientes de interferones de tipo I (IFN), y cumple un papel fundamental en la defensa antiviral contra virus de ADN y ARN. Regula la transcripción de genes de IFN de tipo I (IFN-alfa e IFN-beta) y genes estimulados por IFN (ISG) al unirse a los elementos de respuesta estimulados por interferón (ISRE) en sus promotores, actuando como un activador más potente de IFNB que de IFNA. Referencias relacionadas:
  • PMID:15800576
  • PMID:39719712
• En células no infectadas, Irf3 existe como un monómero citoplásmico inactivo. Después de la infección viral, el ARN de doble cadena (dsRNA) o la señalización por receptores tipo toll (TLR), es fosforilado por las quinasas IKBKE y TBK1, lo que induce un cambio conformacional que conduce a la dimerización, translocación nuclear y asociación con CREBBP para formar el complejo DRAF1, que activa la transcripción de genes de IFN de tipo I e ISG. Irf3 también puede inducir apoptosis en macrófagos primarios. Referencias relacionadas:
  • PMID:16846591
  • PMID:16979567
  • PMID:20049431
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas de Irf3; una isoforma puede actuar como modulador, disminuyendo la actividad transcripcional de la isoforma 1 al competir por la unión al ISRE.
• La localización subcelular de Irf3 incluye citoplasma, núcleo y mitocondrias, lo que refleja su transporte dinámico después de la activación.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen fosforilación, acetilación y ubiquitinación (incluyendo enlace isopéptido y conjugación Ubl), que regulan su actividad, estabilidad e interacciones.
• Irf3 se expresa de forma generalizada en todos los tejidos, lo que coincide con su papel amplio en la inmunidad innata.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 100-200 de Irf3 de ratón; esta región central probablemente está conservada entre especies, lo que sustenta la reactividad cruzada observada con humano y rata. Se recomienda realizar una alineación de secuencias para verificar la conservación del epitopo si se usa en otras especies.
• Para transferencia Western, el peso molecular predicho es de 46 kDa. Utilice controles positivos y negativos adecuados, como lisados de células estimuladas frente a no estimuladas, para confirmar la especificidad.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), optimice la recuperación de antígeno y la dilución del anticuerpo para cada tipo de tejido. La detección puede mejorar en tejidos con respuestas inmunitarias activadas.
• Para ELISA, valide el anticuerpo con proteína Irf3 recombinante o muestras positivas conocidas. Empárello con un anticuerpo de detección adecuado para el desarrollo de ELISA sándwich.
• Dado el papel de Irf3 en la inmunidad innata, considere estimular las células con miméticos virales (por ejemplo, poli(I:C)) o interferones para incrementar la expresión del objetivo y mejorar la detección.

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