Anticuerpo policlonal anti-ITCH para WB, IHC-P, ELISA - Q96J02

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de ITCH

• ITCH (homólogo de la ligasa E3 de ubiquitina-proteína Itchy, también conocida como AIP4, AIF4, ADMFD, NAPP1) es una ligasa E3 que contiene un dominio HECT, acepta ubiquitina de las enzimas E2 y la transfiere directamente a las proteínas sustrato. Referencias relacionadas: PMID:11046148, PMID:14602072, PMID:15051726
• Cataliza la conjugación de poliubiquitina unida a Lys-29, Lys-48 y Lys-63, un proceso esencial para controlar las vías de señalización inflamatoria; como parte de un complejo de edición de ubiquitina con TNFAIP3, TAX1BP1 y RNF11, ITCH garantiza una activación transitoria de NF-kappa-B al mediar la degradación de RIPK1. Referencias relacionadas: PMID:17028573, PMID:18718448, PMID:19131965
• ITCH regula la actividad transcripcional de múltiples factores (p. ej., JUN, JUNB, NFE2) y moléculas de respuesta inmunitaria (p. ej., MAVS, RIPK2) mediante ubiquitinación, influyendo en la producción de citocinas Th2, el desarrollo hematopoyético y la señalización antiviral. Referencias relacionadas: PMID:16387660, PMID:18718448, PMID:19592251, PMID:19881509
• Localizada en la membrana celular, el citoplasma, el núcleo y las membranas endosómicas, ITCH media la clasificación de receptores (p. ej., CXCR4, FZD4) mediante la ubiquitinación de los componentes de ESCRT-0 y PI4K2A, vinculando la ubiquitinación con el tráfico endocítico. Referencias relacionadas: PMID:14602072, PMID:23146885, PMID:34927784
• ITCH promueve la apoptosis y el equilibrio redox al dirigir TXNIP hacia una ubiquitinación ramificada junto con UBR5, y media la señalización antiapoptótica de EGF mediante la degradación de p15 BID. Referencias relacionadas: PMID:20068034, PMID:20392206, PMID:29378950
• Inhibe la replicación del virus de la influenza A al catalizar la ubiquitinación unida a Lys-48 y la degradación proteasómica de la proteína viral M1. Referencias relacionadas: PMID:30328013
• ITCH se expresa ampliamente y está sujeta a acetilación, fosforilación y corte y empalme alternativo, con un peso molecular aproximado de 103 kDa.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Dado que el inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1-155) de ITCH humano, es probable que este anticuerpo policlonal detecte la ITCH de longitud completa (~103 kDa), así como posibles isoformas en lisados de humano, ratón y rata.
• Para WB, considere condiciones reductoras y valide la especificidad de la banda utilizando líneas celulares de control positivo (p. ej., Jurkat, HeLa) y un control negativo (silenciamiento mediante siRNA).
• Para IHC-P, optimice los métodos de recuperación antigénica y la dilución del anticuerpo utilizando cortes de tejido que se sepa que expresan ITCH.
• En ELISA, pruebe formatos directos o de captura y confirme la reactividad con proteína ITCH recombinante.
• Incluya siempre controles adecuados adaptados a su sistema experimental.

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