Anticuerpo monoclonal anti-ITGA1/CD49a () para FC - P56199

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de ITGA1/CD49a

• Identidad de la proteína e isoformas: La integrina alfa-1 (ITGA1), también conocida como CD49a, subunidad alfa de VLA-1 o miembro A de la familia similar al antígeno CD49, es una glucoproteína transmembrana de tipo I de paso único codificada por el gen ITGA1.
• Formación de heterodímeros: Se asocia de forma no covalente con la integrina beta-1 (CD29) para formar el receptor funcional de laminina y colágeno VLA-1 (antígeno de activación muy tardía-1).
• Especificidad de ligando: El complejo integrina alfa-1/beta-1 reconoce la secuencia G-F-P-G-E-R hidroxilada en prolina del colágeno y también se une a la laminina.
• Función: ITGA1 media la regulación negativa dependiente del anclaje del crecimiento celular estimulado por EGF, contribuyendo a los procesos de adhesión y señalización celular.
• Localización subcelular: La proteína se encuentra en la membrana celular y presenta un gran dominio extracelular, una única hélice transmembrana y una cola citoplasmática corta.
• Modificaciones postraduccionales y dominios: ITGA1 contiene múltiples dominios de unión al calcio y al magnesio, enlaces disulfuro y está ampliamente glucosilada. Incluye un péptido señal N-terminal y múltiples regiones repetitivas.
• Peso molecular: La proteína madura tiene un peso molecular calculado de aproximadamente 130.848 Da, en consonancia con la banda de aproximadamente 131 kDa observada en condiciones reductoras.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca el gran dominio extracelular (aminoácidos 29–1141), lo que sugiere que el anticuerpo se une a un epítopo extracelular accesible para la tinción de células vivas mediante citometría de flujo sin necesidad de permeabilización.
• Dado que el anticuerpo está conjugado directamente con , no se requiere un reactivo secundario de detección, lo que simplifica el flujo de trabajo de FC.
• Considere titular el anticuerpo (por ejemplo, 0,1–1 µg por prueba) en el tipo de célula objetivo para determinar la concentración de tinción óptima. Utilice un control de isotipo adecuado conjugado con el mismo fluoróforo para evaluar la unión inespecífica.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en muestras humanas que expresen ITGA1/CD49a, como células T activadas, células endoteliales o determinadas líneas celulares epiteliales.
• Para la tinción de la superficie celular, utilice protocolos estándar para células vivas; evite la fijación salvo que sea necesaria, ya que puede alterar la accesibilidad del epítopo o la intensidad del fluoróforo.

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