Anticuerpo monoclonal de conejo anti-JNK1/JNK3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P45983 / P53779

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de JNK1/JNK3

• La quinasa 8 activada por mitógenos (MAPK8), también conocida como JNK1, es una quinasa de serina/treonina que actúa como componente central de la vía de señalización de la quinasa de proteína activada por estrés/c-Jun N-terminal (SAP/JNK), activada por estrés extracelular y citoquinas proinflamatorias. Referencias relacionadas: PMID:28943315
• Tras la activación, JNK1 fosforila y regula factores de transcripción AP-1 como JUN, JDP2 y ATF2, controlando así programas de expresión génica involucrados en la proliferación, diferenciación y supervivencia celular. Referencias relacionadas: PMID:18307971
• En respuesta al estrés, JNK1 promueve la apoptosis fosforilando reguladores críticos como p53/TP53 y la proteína asociada a Yes YAP1, y media la fosforilación de BAD para la supervivencia de células eritroides, así como la fosforilación de BCL2 inducida por inanición que desencadena la autofagia. Referencias relacionadas: PMID:21364637, PMID:21095239, PMID:18570871
• JNK1 fosforila el heterodímero CLOCK-BMAL1, desempeñando un papel directo en la regulación del reloj circadiano. Referencias relacionadas: PMID:22441692
• Una función proinflamatoria clave implica la fosforilación de NLRP3, que promueve el ensamblaje del inflamasoma NLRP3. Referencias relacionadas: PMID:28943315
• Bajo estrés oxidativo, JNK1 se dirige a varios sustratos, incluido EIF4ENIF1 para el ensamblaje de cuerpos P, SIRT6 para estimular su actividad de mono-ADP-ribosiltransferasa, y ALKBH5 para mejorar su SUMOilación e inactivación. Referencias relacionadas: PMID:22966201, PMID:27568560, PMID:34048572
• JNK1 se localiza en el citoplasma, núcleo y sinapsis, y el empalme alternativo produce múltiples isoformas (alfa-1, alfa-2, beta-1, beta-2) con distintas propiedades de unión a sustratos, afinando los eventos de señalización posteriores.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca la región N-terminal (aa 1–383) de JNK1, lo que puede detectar múltiples isoformas y formas fosforiladas y no fosforiladas; sin embargo, se deben considerar los cambios de movilidad dependientes de la activación y la presencia de reactividad cruzada con JNK3 al interpretar los patrones de bandas.
• Para Western blot, espere bandas alrededor de 46–48 kDa, con posibles señales adicionales más bajas que reflejen isoformas o productos de degradación; incluya controles positivos y negativos apropiados (por ejemplo, lisados que expresan JNK2 frente a lisados deficientes en JNK2) para confirmar la especificidad.
• En IHC-P e IF/ICC, se pueden aplicar protocolos estándar de fijación y recuperación de antígeno; sin embargo, las condiciones óptimas deben determinarse empíricamente para cada tipo de tejido o célula, y la ausencia de reactividad cruzada con JNK2 puede aprovecharse para distinguir la localización específica de JNK1/3.
• Dado que el anticuerpo no reconoce JNK2, es muy adecuado para experimentos donde se requiere discriminar entre JNK1/3 y JNK2, como en estudios de silenciamiento o sobreexpresión paralelos.
• Considere estimular células con anisomicina o tratamiento con UV para inducir la activación de JNK y validar la capacidad del anticuerpo para detectar cambios en la señalización inducidos por estrés.

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