Anticuerpo policlonal de conejo anti-KAT2A (GCN5) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q92830

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de KAT2A

• KAT2A es una aciltransferasa de lisina versátil que utiliza acetil-CoA, succinil-CoA, glutaril-CoA, crotonil-CoA y lactoil-CoA para modificar proteínas histónicas y no histónicas, ampliando su repertorio regulador más allá de la acetilación clásica. Referencias relacionadas: PMID:31542297 PMID:29211711 PMID:37040526 PMID:39561764
• En los complejos SAGA y ATAC, KAT2A funciona como una acetiltransferasa de histonas (HAT) con una marcada preferencia por acetilar la histona H3 en Lys-9 (H3K9ac), promoviendo la activación epigenética de la transcripción. También acetila H1.4K34 y la variante H2A.Z. Referencias relacionadas: PMID:17301242 PMID:19103755 PMID:29211711 PMID:21131905 PMID:22465951 PMID:29973595 PMID:31527837
• KAT2A media la succinilación de histonas (H3K79succ) y la glutarilación (H4K91glu), modificaciones que influyen en la estabilidad de los nucleosomas y la transcripción. La succinilación depende de su asociación con el complejo deshidrogenasa de 2-oxoglutarato. Referencias relacionadas: PMID:29211711 PMID:31542297
• Más allá de las histonas, KAT2A acetila proteínas reguladoras clave como PPARGC1A (suprimiendo la gluconeogénesis), TBX5 (controlando el transporte nucleocitoplasmático) y PLK4 (limitando la amplificación de los centrosomas), vinculando su actividad con el metabolismo, el desarrollo y el control del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:16753578 PMID:23142079 PMID:27796307 PMID:29174768
• KAT2A es fundamental para diversos procesos, incluida la consolidación de la memoria a largo plazo, la activación de las células T, el desarrollo craneofacial y la pluripotencia de las células madre embrionarias, actuando mediante programas específicos de expresión génica.
• La localización subcelular incluye el núcleo, los cromosomas, el citoplasma y el centrosoma, lo que permite a KAT2A regular objetivos cromatínicos y citoplasmáticos.
• Se expresa de forma ubicua en los tejidos y KAT2A también interactúa con la proteína Tat del VIH-1 para modular la remodelación de la cromatina proviral y la actividad transcripcional.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la región N-terminal (aa 1-100) de KAT2A humana; por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer KAT2A de longitud completa y ciertas variantes de splicing. Valide la especificidad en el tejido o la línea celular de interés.
• Para la transferencia Western, el peso molecular previsto es de 94 kDa, pero las modificaciones postraduccionales (fosforilación, acetilación) pueden provocar desplazamientos de las bandas. Considere utilizar inhibidores de proteasas/fosfatasas frescos y optimizar el porcentaje del gel en consecuencia.
• En IHC-P, asegúrese de realizar una recuperación antigénica adecuada (por ejemplo, recuperación de epítopos inducida por calor con tampón citrato a pH 6,0) y valide la tinción con controles positivos y negativos apropiados. La reactividad cruzada con ratón y rata hace que este anticuerpo sea adecuado para estudios multiespecie, pero verifique siempre el sistema de muestras pertinente.
• Para IF/ICC, deben optimizarse las condiciones de permeabilización y fijación; la presencia de KAT2A tanto en compartimentos nucleares como citoplasmáticos puede requerir parámetros de obtención de imágenes cuidadosamente ajustados.
• ELISA puede utilizarse para la detección cuantitativa; ajuste la concentración del anticuerpo y combínelo con un reactivo de detección adecuado. Dado que se trata de un anticuerpo policlonal, considere su potencial para capturar múltiples epítopos.

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